CD58在兒童B-ALL中的表達(dá)及其用于MRD檢測(cè)的可行性研究.pdf

1、背景與目的:
　　急性淋巴細(xì)胞白血病是兒童時(shí)期常見的惡性血液系統(tǒng)疾病，其中急性 B淋巴細(xì)胞白血?。˙-ALL）發(fā)病率占到急性淋巴細(xì)胞白血病的85％。通過(guò)規(guī)律的聯(lián)合化療，兒童急性白血病的首次化療后完全緩解率已達(dá)90%以上，5年生存率可達(dá)80%，但是患者完全緩解后復(fù)發(fā)仍然是白血病治療過(guò)程中的最大障礙。白血病復(fù)發(fā)的根源在于體內(nèi)殘存有少量的白血病細(xì)胞。目前，臨床上監(jiān)測(cè)白血病微小殘留?。∕RD）最常用的檢測(cè)方法是多參數(shù)流式細(xì)胞術(shù)（FCM），

2、具有快速，準(zhǔn)確，簡(jiǎn)便等特點(diǎn)。FCM檢測(cè)MRD的關(guān)鍵點(diǎn)在于選擇適用的免疫標(biāo)記物組成合適的組合，該組合能夠高度靈敏特異地鑒別正常細(xì)胞和白血病細(xì)胞。淋巴細(xì)胞功能相關(guān)抗原-3（CD58），屬于免疫球蛋白超家族，在體內(nèi)多種細(xì)胞上均有表達(dá)。已有報(bào)道稱CD58在成人B-ALL白血病細(xì)胞的表達(dá)率高于正常的B系前體細(xì)胞，因此可能作為MRD檢測(cè)的一種新的免疫標(biāo)記物，但是目前CD58在兒童ALL中的表達(dá)特點(diǎn)尚沒有關(guān)注。本研究以兒童B-ALL患者為研究對(duì)象，分

3、析CD58在兒童B-ALL中的表達(dá)特點(diǎn)，并探討其用于兒童B-ALL MRD檢測(cè)的可行性。
　　資料和方法:
　　選取鄭州大學(xué)第一附屬醫(yī)院兒科血液病區(qū)收治的B-ALL初診患兒87例，所有病例都經(jīng)FAB分型和流式細(xì)胞術(shù)檢查明確診斷。選取CD58/CD10/CD19/CD45抗體組合，應(yīng)用四色流式細(xì)胞術(shù)（FCM）分別在初診時(shí)和化療第19天檢測(cè)B-ALL患兒白血病細(xì)胞表面 CD58的表達(dá)強(qiáng)度。按照年齡、性別相匹配的原則，選取20例缺

4、鐵性貧血患兒和5例經(jīng)誘導(dǎo)化療完全緩解后的T-ALL患兒骨髓標(biāo)本作為對(duì)照組。在誘導(dǎo)化療第33天并且達(dá)到臨床完全緩解后，同時(shí)采用實(shí)時(shí)熒光定量多聚酶鏈反應(yīng)（RQ-PCR）和流式細(xì)胞術(shù)對(duì)B-ALL患者進(jìn)行微小殘留檢測(cè)。
　　結(jié)果:
　?。?）87例B-ALL患兒骨髓白血病細(xì)胞膜表面CD58平均MFI為90.82±33.23，對(duì)照組中20例缺鐵性貧血兒童骨髓中正常B系前體細(xì)胞膜表面CD58平均MFI為13.52±6.27，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)

5、意義（t=10.33，P<0.001）；CD58在B-ALL患兒骨髓異常細(xì)胞的表達(dá)強(qiáng)度顯著高于正常骨髓B系前體細(xì)胞。
　　（2）5例經(jīng)誘導(dǎo)化療后完全緩解的T-ALL患兒骨髓中B系前體細(xì)胞膜表面CD58平均MFI為15.34±4.19，與B-ALL患兒初診時(shí)CD58的表達(dá)強(qiáng)度比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（t=9.746，P<0.01），但是和正常骨髓細(xì)胞中的B系前體細(xì)胞比較差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（t=0.611，P=0.506）。
　?。?

6、）隨機(jī)檢測(cè)38例B-ALL患兒在化療第19天時(shí)骨髓細(xì)胞CD58的表達(dá)強(qiáng)度，與他們?cè)诔踉\時(shí)的CD58表達(dá)強(qiáng)度相比較。結(jié)果顯示初診時(shí)的CD58 MFI為106.57±25.90，化療第19天的骨髓細(xì)胞CD58 MFI為100.48±22.31,差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（t=0.801，P=0.428）。
　?。?）根據(jù)白血病細(xì)胞和正常的B系前體細(xì)胞在CD58和CD10雙參數(shù)流式細(xì)胞圖上的分布特點(diǎn)，87例B-ALL患兒中有48例患兒可以適用CD

7、58抗體組合檢測(cè)MRD，CD58抗體組合覆蓋率為55.1%。
　　（5）選取CD58/CD10/CD19/CD45抗體組合采用流式細(xì)胞術(shù)對(duì)48例CD58高表達(dá)的B-ALL患兒（化療33天時(shí)）進(jìn)行MRD檢測(cè)，陽(yáng)性9例，陰性39例；采用RT-PCR法檢測(cè)MRD結(jié)果為陽(yáng)性11例，陰性37例。其中46例（95.8%）檢測(cè)結(jié)果一致，差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（χ2=0.50，P=0.500）。
　?。?）B-ALL患兒中CD58高表達(dá)組MRD陽(yáng)