美洛昔康、易孚在大鼠創(chuàng)面愈合過程中對Survivin、PTEN表達(dá)的影響.pdf

1、目的:本實(shí)驗(yàn)擬通過建立深度創(chuàng)面模型，旨在研究COX-2抑制劑、易孚在大鼠創(chuàng)面愈合中對Survivin、PTEN蛋白表達(dá)、瘢痕面積及創(chuàng)面愈合時(shí)間的影響，以期為預(yù)防、治療病理性瘢痕（包含增生性瘢痕、瘢痕疙瘩）提供一種新的方式。
　　方法:隨機(jī)選取40只SD大鼠，背部脫毛后于脊柱兩側(cè)對稱處做四處大小約10mm*5mm*1mm的深達(dá)肌層創(chuàng)面。以每組10只隨機(jī)分配所有實(shí)驗(yàn)對象分別入A、B、C、D四組。其中A組為對照組，B組為美洛昔康組，C組

2、為重組人表皮生長因子凝膠（易孚）組，D組為美洛昔康與易孚聯(lián)合應(yīng)用組。B、D組分別于術(shù)前1/2h及術(shù)后第2d、4d、6d、8d、10d于后肢肌肉注射0.05％美洛昔康0.8ml，同時(shí)A、C組于相同部位肌注生理鹽水0.8ml。C、D組分別于術(shù)后立即、2d、4d、6d、8d、10d予以10ug/L易孚紗布濕敷創(chuàng)面，A、B組則以0.9％NS紗布濕敷，予以醫(yī)用敷貼包扎固定。其后四組予以同樣條件飼養(yǎng)，并于隔天更換敷料至愈合。于術(shù)后依據(jù)左上、右上、左

3、下、右下次序按次于第3d、14d、28 d取各組創(chuàng)面，并分別行免疫組化染色、HE染色及觀察各組創(chuàng)面愈合時(shí)間和計(jì)算瘢痕面積，取其均數(shù)進(jìn)行比較。Survivin、PTEN圖像分析方法:用Image-pr06.0圖像分析軟件系統(tǒng)，用IOD值代替表示Survivin、PTEN兩者的表達(dá)強(qiáng)度。每張免疫組化染色切片在高倍鏡下觀察5個(gè)視野，分別測定每一張標(biāo)本的每一個(gè)視野的IOD值，取5個(gè)視野的均數(shù)作為該標(biāo)本的IOD值，并進(jìn)行比較。結(jié)果:1、初始面積:

4、四組兩兩比較P＞0.05，無統(tǒng)計(jì)學(xué)差異。2、愈合時(shí)間:C組最短，A、D組相近，但均比C組稍差，B組最長。3、PTEN:第3天時(shí)，四組組間比較P＜0.05，表明各組差異顯著，有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義;第14天時(shí)，A、C、D三組P＞0.05，三組未見統(tǒng)計(jì)學(xué)意義;B組與其他各組比較P＜0.05，組間差異顯著，有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義;第28天時(shí)，組間比較均出現(xiàn)P＞0.05，無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。但在PTEN表達(dá)強(qiáng)度上我們可以看出各組在同一時(shí)間點(diǎn)上，均有B組＞D組＞A組＞C組

5、。4、Survivin:在第3天及在第28天時(shí)，在組間比較中，A、D兩組P＞0.05，提示兩組第3天及第28天的表達(dá)未表現(xiàn)出差異及統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，B、C兩組P＜0.05，表明Survivin的表達(dá)量在B、C兩組間存在顯著差異及統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。在第14天時(shí)，四組均P＜0.05，表示組間比較存在顯著差異，有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。而在表達(dá)量上我們可以看出在同一時(shí)間點(diǎn)上，均有C組＞D組＞A組＞B組。5、瘢痕質(zhì)地: A組質(zhì)硬，余三組質(zhì)地較軟，無明顯差別。6、鏡下見

6、:第28天時(shí)，四組瘢痕比較，A組膠原纖維排列紊亂，局部漩渦狀，而D組纖維細(xì)胞排列較緊密、有序，B、C組則介于A、D組之間。5、愈后瘢痕面積:A組＞B組＞C組＞D組，組間比較P＜0.05，存在顯著差異，有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。結(jié)論:1、EGF可以有效促進(jìn)Survivin表達(dá)及加快創(chuàng)面愈合，有利于降低瘢痕形成率;2、傷后PTEN與Survivin組織中的表達(dá)強(qiáng)度與創(chuàng)面狀態(tài)相關(guān);3、美洛昔康可以促進(jìn)PTEN的表達(dá)及抑制Survivin的表達(dá)，可能與后期