PAR-2在自體移植皮片過度色素沉著中表達的實驗研究.pdf

1、[研究背景]
　　自體皮片移植術是整形外科常見手術，然而術后常見植皮區(qū)過度色素沉著，主要原因是植皮區(qū)皮膚表皮內(nèi)黑色素的含量上升，尤其在顏面部和四肢暴露部位，嚴重影響了患者的心理健康和社會交往，其機制機理目前仍不清楚，一直是臨床工作難以解決的問題。
　　[研究目的]
　　通過檢測豚鼠腹部自體全厚皮片移植術后植皮區(qū)過度色素沉著皮片中黑色素含量與蛋白酶激活受體2，以及抑制劑大豆胰蛋白酶抑制劑觀察移植皮片中黑色素沉著改變情況，

2、探討蛋白酶激活受體2在自體全厚皮片移植后過度色素沉著的作用。進一步闡述自體全厚皮片移植后過度色素沉著的機制機理。
　　[研究方法]
　　將白色、棕黃色、黑色豚鼠共30只分成甲、乙、丙三組，每組各10只，行自體全厚皮片移植，觀察自體全厚皮片移植后2周至16周不同時間點移植皮片中的黑色素的含量變化情況，篩選出自體全厚皮片移植后過度色素沉著的理想模型。采用免疫組化、western-blot、Realtime qPCR方法檢測蛋白酶

3、激活受體2在自體移植過度色素沉著皮片中和正常皮片中的表達的差異。將黑色豚鼠過度色素沉著移植皮片右邊皮片分設A組，為實驗組;左邊皮片設為B組;為對照組。實驗組使用蛋白酶激活受體2的活性抑制劑大豆胰蛋白酶抑制劑50μmol/L濃度涂抹于移植后過度色素沉著的皮片，對照組使用安慰劑（乙醇與丙醇按體積比為70∶30的混合物）涂抹，每天3次，每周7天，4周后采用Masson-Fontana黑色素染色方法和軟件image pro-plus6.0觀察和

4、分析皮片中黑色素含量變化。
　　[研究結(jié)果]
　　1、白色豚鼠術后第2至16周移植皮片中黑色素平均光密度值與對照組比較差異無統(tǒng)計學意義，棕黃色豚鼠術后2、3周移植皮片中黑色素平均光密度值與對照組比較差異有統(tǒng)計學意義，第4至16周比較差異無統(tǒng)計學意義，黑色豚鼠術后2、3、4周移植皮片黑色素平均光密度值與對照組比較差異有統(tǒng)計學意義，第8至12周差異無統(tǒng)計學意義，第16周與對照組比較差異有統(tǒng)計學意義。
　　2、免疫組化結(jié)果:

5、黑色豚鼠自體全厚皮片移植后過度色素沉著皮片中表皮及毛囊中角質(zhì)形成細胞中蛋白酶激活受體2的表達明顯要高于正常對照皮片。
　　3、Western-blot結(jié)果:黑色豚鼠自體全厚皮片移植后過度色素沉著皮片中蛋白酶激活受體2的表達明顯要高于正常對照皮片。
　　4、Realtime-PCR結(jié)果:黑色豚鼠自體移植過度色素沉著皮片中蛋白酶激活受體2的基因表達較正常對照皮片比較差異有統(tǒng)計學意義。
　　5、黑色豚鼠過度色素沉著移植皮片使

6、用蛋白酶激活受體-2抑制劑大豆胰蛋白酶抑制劑涂抹4周后，移植皮片中黑色素平均光密度值與陰性對照組比較差異有統(tǒng)計學意義。
　　[研究結(jié)論]
　　1、通過三種不同顏色豚鼠的自體全厚皮片移植后色素沉著的觀察，發(fā)現(xiàn)黑色豚鼠在自體皮片移植后16周時出現(xiàn)了自體全厚皮片移植后過度色素沉著。黑色豚鼠是自體全厚皮片移植后過度色素沉著的理想模型。
　　2、通過大體觀察、Masson-Fontana黑色素染色法、免疫組化、western-b