CCK-8對LPS誘導(dǎo)ECV-304 iNOS表達的調(diào)節(jié)作用及其信號轉(zhuǎn)導(dǎo)機制的研究.pdf

1、內(nèi)毒素休克是臨床常見的休克類型之一，死亡率極高，一直是醫(yī)學(xué)研究的重點課題。內(nèi)毒素休克的主要發(fā)生原因是嚴重的外源性感染、中毒；在法醫(yī)學(xué)實踐中，嚴重創(chuàng)傷、失血失液及嚴重應(yīng)激可引起體循環(huán)血壓下降’或體內(nèi)血液再分布，致使腸粘膜缺血及局部免疫功能紊亂、腸粘膜屏障功能破壞，腸源性內(nèi)毒素脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)入血，造成腸源性內(nèi)毒素血癥，也是內(nèi)毒素休克發(fā)生的常見原因。 血管調(diào)節(jié)機制紊亂是內(nèi)毒素休克特征性病理改變之

2、一，主要表現(xiàn)為內(nèi)毒素休克發(fā)生早期主動脈壓下降、肺動脈壓升高以及離體肺動脈及主動脈血管反應(yīng)異常變化。研究發(fā)現(xiàn)，血管內(nèi)皮細胞(vascularendothelialcells，VEC)能合成多種血管活性物質(zhì)，是維持血管正常張力狀態(tài)和血管反應(yīng)性的關(guān)鍵因素。其中VEC釋放的一氧化氮(nitricoxide，NO)是人們發(fā)現(xiàn)的機體第一種氣體信使分子，具有明顯的血管活性、介導(dǎo)了血管內(nèi)皮依賴性舒張反應(yīng)。在內(nèi)毒素休克過程中VEC是LPS及其誘導(dǎo)機體產(chǎn)生

3、的多種促炎細胞因子如TNF、IL-1作用的主要靶細胞，VEC誘導(dǎo)型一氧化氮合酶(induciblenitricoxidesynthase，iNOS)激活、NO大量誘生而內(nèi)皮型一氧化氮合酶(endothelialnitricoxidesynthase，eNOS)活性被抑制、NO生成障礙，是血管反應(yīng)性異常變化、血管調(diào)節(jié)機制紊亂的重要發(fā)病環(huán)節(jié)。適當調(diào)控VECNO生成有助于緩解內(nèi)毒素休克血管調(diào)節(jié)機制紊亂、減輕血液動力學(xué)異常變化，成為防治內(nèi)毒素休

4、克的重要途徑。 八肽膽囊收縮素(cholecystokininoctapeptide，CCK-8)是一種十分重要的神經(jīng)調(diào)節(jié)肽，具有明確的抗內(nèi)毒素休克作用。用CCK-8預(yù)處理內(nèi)毒素休克大鼠可使降低的平均動脈壓回升而增高的肺動脈壓降低，提高離體肺動脈、胸主動脈的血管內(nèi)皮依賴性舒張反應(yīng)，改善胸主動脈對縮血管劑反應(yīng)性降低，表明CCK-8的抗內(nèi)毒素休克效應(yīng)存在著外周血管機制，與調(diào)控VECNO生成有關(guān)。然而CCK-8抗休克作用的分子機制，特

5、別是調(diào)控VECNO生成的分子機制尚未完全闡明，有待于進一步探討。本課題利用培養(yǎng)的人臍靜脈內(nèi)皮細胞株ECV-304，首先觀察CCK-8對LPS誘導(dǎo)NO/iNOS生成及表達的影響；其次，鑒于CCK-8是機體內(nèi)源性調(diào)節(jié)肽，通過CCK受體(CCK-R)發(fā)揮其生物學(xué)作用，CCK-R屬于G蛋白偶聯(lián)受體，在體內(nèi)分布十分廣泛。新近的研究發(fā)現(xiàn)，在VEC存在CCK-RmRNA表達，LPS可誘導(dǎo)其表達上調(diào)。本實驗研究CCK-R在CCK-8調(diào)節(jié)LPS誘導(dǎo)NO/