空間訓練促進Aβ1-42注射大鼠海馬新生細胞的短期存活和神經(jīng)元樣分化的研究.pdf

1、背景:
　　阿爾茨海默?。ˋlzheimer’s disease, AD）是最常見的癡呆類型，其主要表現(xiàn)為記憶和其他認知功能的進行性下降，目前尚缺乏有效的治療手段。認知刺激療法對臨床患者認知功能有改善作用，但分子機制不清楚。
　　神經(jīng)發(fā)生持續(xù)性存在于哺乳動物腦內(nèi)，主要位于海馬齒狀回（DG）的顆粒細胞下區(qū)和側(cè)腦室內(nèi)壁的室管膜下區(qū)。齒狀回的神經(jīng)發(fā)生在海馬介導的學習和記憶中發(fā)揮著重要作用。神經(jīng)發(fā)生的損傷與AD轉(zhuǎn)基因鼠和AD患者的認

2、知損傷有著強烈的相關(guān)性。在正常動物中研究發(fā)現(xiàn)，空間訓練可影響海馬新生細胞的發(fā)生和命運，然而在AD動物模型中，空間訓練對海馬齒狀回的神經(jīng)發(fā)生有著怎樣的影響，目前并不清楚。
　　目的:
　　本研究旨在對AD動物模型進行空間訓練干預，探討空間訓練對AD模型鼠海馬DG區(qū)神經(jīng)發(fā)生的影響。
　　方法:
　　利用Aβ1-42寡聚體側(cè)腦室定位注射建立AD動物模型；利用Morris水迷宮進行連續(xù)6天的空間訓練；通過胸腺嘧啶類似物—

3、—5'-溴脫氧尿嘧啶核苷（BrdU）腹腔注射標記3個時間點——訓練前1周、訓練早期1-4天和訓練晚期5-6天新生的神經(jīng)細胞；采用免疫組化方法對BrdU免疫陽性細胞進行計數(shù)，檢測DG區(qū)新生細胞的存活；采用免疫熒光方法對Ki67免疫陽性細胞進行計數(shù)，檢測DG區(qū)細胞的增殖；通過成熟神經(jīng)元標志物NeuN和神經(jīng)膠質(zhì)細胞標志物GFAP分別與BrdU進行免疫熒光雙標，檢測新生細胞的遷移和分化；通過條件性恐懼記憶實驗檢測空間訓練對AD模型鼠記憶能力的改

4、善作用。
　　結(jié)果:
　　通過BrdU免疫陽性細胞計數(shù)發(fā)現(xiàn)，在空間訓練結(jié)束后24小時檢測，空間訓練增加了AD模型鼠訓練前1周、訓練早期和訓練晚期產(chǎn)生的新生細胞的存活；而在BrdU標記后28天檢測，AD模型鼠訓練前1周、訓練早期和訓練晚期新生細胞的存活在訓練組與未訓練組均沒有差異。通過Ki67免疫陽性細胞計數(shù)發(fā)現(xiàn)，在訓練結(jié)束后24小時和28天，空間訓練均顯著增加了AD模型鼠神經(jīng)細胞的增殖。通過BrdU/NeuN和BrdU/GF

5、AP免疫熒光雙標對雙陽性細胞計數(shù)發(fā)現(xiàn)，在BrdU標記后28天，空間訓練對AD模型鼠和對照鼠新生神經(jīng)細胞從顆粒細胞下區(qū)向顆粒細胞層的遷移沒有影響；在BrdU標記后28天，空間訓練促進了AD模型鼠訓練前1周、訓練早期和訓練晚期三個階段產(chǎn)生的新生神經(jīng)細胞更多地轉(zhuǎn)化為成熟神經(jīng)元，而并未改變新生細胞向神經(jīng)膠質(zhì)細胞的分化。條件性恐懼記憶實驗結(jié)果顯示，空間訓練增加了AD模型鼠的近期條件恐懼記憶能力，而對遠期恐懼記憶能力沒有影響。
　　結(jié)論: