抗旱相關(guān)基因?qū)τ衩缀蛿M南芥的轉(zhuǎn)化.pdf_第1頁(yè)
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文檔簡(jiǎn)介

1、干旱強(qiáng)光可造成植物的滲透脅迫和氧化毒害。植物體可以在體內(nèi)積累甜菜堿以緩解滲透脅迫。植物體內(nèi)的過氧化氫酶(CAT)可以有效清除植物體內(nèi)產(chǎn)生的H<,2>O<,2>。但是CAT在植物體內(nèi)主要存在于過氧化物體中，而干旱強(qiáng)光等脅迫條件下，葉綠體是產(chǎn)生活性氧的主要部位。因此將合成甜菜堿的關(guān)鍵酶基因-badh導(dǎo)入植物體中，將CAT定向?qū)肴~綠體中對(duì)于提高植物的抗旱性具有重要的作用。 將豌豆過氧化氫酶基因(融合二磷酸核酮糖羧化酶小亞基基因的轉(zhuǎn)運(yùn)

2、肽片段以引導(dǎo)基因產(chǎn)物定位于葉綠體)和甜菜堿醛脫氫酶(BADH)基因構(gòu)建到p3301載體上。將構(gòu)建好的載體轉(zhuǎn)化玉米和擬南芥，玉米在含有20mg/L除草劑的培養(yǎng)基上篩選得到25個(gè)株系，擬南芥在0.5％(v/v)的除草劑下篩選得到10個(gè)株系。通過PCR、RT-PCR、植株總蛋白Western blot等檢測(cè)，證明目的基因已經(jīng)整合到玉米和擬南芥基因組中，并能在擬南芥中轉(zhuǎn)錄和翻譯。轉(zhuǎn)基因擬南芥的抗性生理實(shí)驗(yàn)表明，在20％PEG<,6000>滲透脅

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