2023年全國碩士研究生考試考研英語一試題真題(含答案詳解+作文范文)_第1頁
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文檔簡介

1、目的:
  檢測長鏈非編碼RNA母系表達基因3(maternally expressed gene3 MEG3)在小兒先天性巨結腸(Hirschsprung’s disease HD)病變腸管中的表達情況,并通過觀察過表達MEG3對人神經(jīng)母細胞瘤細胞株(SK-N-BE(2))增殖、克隆、侵襲及凋亡的影響,探討MEG3在HD中的作用及作用機制。
  方法:
  用RT-qPCR方法檢測17例HD患兒病變結腸組織和17例非

2、HD也無腸道畸形嬰兒正常結腸組織中MEG3的表達量,用PASS檢測其效能,并用ROC曲線下面積(AUC)及95%可行區(qū)間表示MEG3在HD中的診斷效能,評價MEG3在HD中的診斷價值。應用細胞培養(yǎng)及轉染技術,在SK-N-BE(2)細胞中轉染MEG3過表達質粒,設立MEG3高表達組、空載體組及對照組,并應用CCK-8、Edu細胞增殖實驗、平板克隆技術、TRANSWELL技術、流式細胞實驗分別檢測過表達MEG3對SK-N-BE(2)細胞的增

3、殖能力、克隆能力、侵襲能力及凋亡情況的影響。
  結果:
  RT-qPCR結果顯示:HD患兒病變結腸組織中MEG3表達量較正常結腸組織中MEG3表達量明顯升高(P<0.01),效能檢測顯示效能達標,實現(xiàn)100%的檢測功率,ROC曲線顯示:曲線下面積(AUC)為84.9%,(95%可行區(qū)間71.6%-98.3%),最佳陽性截斷值(cut off value)為1.46,靈敏度為82.4%,特異度為82.4%。MEG3過表達質

4、粒轉染SK-N-BE(2)細胞,轉染效率為35.4%,達到轉染要求,MEG3過表達組細胞的增殖能力、克隆能力以及侵襲能力與空載體組及對照組比較明顯降低(P<0.01),流式細胞檢測顯示:MEG3高表達組與空載體組及對照組比較細胞凋亡明顯增加(P<0.01)。
  結論:
  HD患兒病變結腸組織中MEG3表達量明顯升高,MEG3可能通過調控SK-N-BE(2)細胞的增殖、克隆、侵襲與凋亡參與HD的發(fā)病,在HD的早期診斷與治療

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