雌激素替代治療對(duì)中年卵巢切除大鼠大腦白質(zhì)及海馬內(nèi)髓鞘及Lingo-1蛋白的影響.pdf

1、由于雌激素的缺乏，絕經(jīng)后婦女認(rèn)知功能下降的進(jìn)程明顯加快。動(dòng)物實(shí)驗(yàn)和臨床研究已經(jīng)證實(shí)雌激素替代治療(estrogen replacement therapy，ERT)可以改善絕經(jīng)后卵巢切除后大鼠和絕經(jīng)后女性的認(rèn)知能力，但其機(jī)制尚不明確。髓鞘結(jié)構(gòu)的異常導(dǎo)致的神經(jīng)纖維傳導(dǎo)速度下降是大腦認(rèn)知功能下降的重要原因之一。體視學(xué)研究發(fā)現(xiàn)一個(gè)月的ERT對(duì)卵巢切除大鼠的髓鞘具有保護(hù)作用。而富含亮氨酸重復(fù)序列和免疫球蛋白結(jié)構(gòu)域的Nogo受體作用蛋白-1(Le

2、ucine-rich repeat and Ig domain containing NOGOreceptor interacting protein-1，Lingo-1)在抑制髓鞘形成中發(fā)揮著重要的作用，提示Lingo-1可能參與雌激素保護(hù)大腦髓鞘結(jié)構(gòu)和認(rèn)知功能的過(guò)程。
　　目的：
　　檢測(cè)經(jīng)短期雌激素替代治療(Estrogen replacement therapy，ERT)后中年卵巢切除大鼠大腦白質(zhì)及海馬內(nèi)髓鞘相關(guān)的指

3、標(biāo)以及Lingo-1的表達(dá)情況，探討雌激素對(duì)髓鞘作用的可能機(jī)制。
　　方法：
　　1.隨機(jī)選取24只中年(9～12月齡)雌性SD大鼠行雙側(cè)卵巢切除術(shù)(Ovariectomized,OVX)，恢復(fù)1個(gè)月后，隨機(jī)分為安慰劑治療組(OVX+Veh組，n=12)和雌激素替代治療組(OVX+E組，n=12)。OVX+E組大鼠給予持續(xù)1個(gè)月的17β-estradiol頸背部皮下注射，OVX+Veh組大鼠給予持續(xù)1個(gè)月的芝麻油頸背部皮下注

4、射。分別檢測(cè)在術(shù)后及ERT后的血清雌激素水平。
　　2.雌激素替代治療1個(gè)月后，運(yùn)用Morris水迷宮檢測(cè)OVX+Veh組大鼠與OVX+E組大鼠的空間學(xué)習(xí)、記憶能力。
　　3.隨后每組大鼠隨機(jī)選取5只，運(yùn)用透射電子顯微鏡觀察兩組大鼠大腦白質(zhì)及海馬內(nèi)髓鞘的超微結(jié)構(gòu)，運(yùn)用免疫組化方法檢測(cè) Lingo-1在大腦白質(zhì)及海馬的分布情況。
　　4.最后每組再隨機(jī)選取5只大鼠，運(yùn)用Western blot檢測(cè)兩組大鼠大腦白質(zhì)及海馬區(qū)

5、域內(nèi)髓磷脂堿性蛋白(Myelin basic protein，MBP)及Lingo-1的蛋白表達(dá)水平。
　　結(jié)果：
　　1.一個(gè)月的ERT后，OVX+E組大鼠血清雌激素水平顯著高于卵巢切除術(shù)后大鼠的血清雌激素水平和安慰劑治療后OVX+Veh組大鼠的血清雌激素水平(P＜0.05)。且卵巢切除術(shù)后大鼠的血清雌激素水平和安慰劑治療后OVX+Veh組大鼠的血清雌激素水平之間沒(méi)有顯著性差異(P＞0.05)。
　　2.在第1天的可

6、見(jiàn)平臺(tái)實(shí)驗(yàn)中，兩組大鼠的尋臺(tái)潛伏期無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P＞0.05)。在第2-5天的定位航行實(shí)驗(yàn)中，OVX+E組大鼠的逃避潛伏期明顯短于OVX+Veh組(P＜0.05)。在第6天的空間探索實(shí)驗(yàn)中，兩組大鼠的游泳速度、目標(biāo)象限游泳時(shí)間和目標(biāo)象限游泳路程百分比均無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P＞0.05)。
　　3.透射電鏡結(jié)果顯示，OVX+Veh組大鼠大腦白質(zhì)、海馬存在顯著的髓鞘變性，而OVX+E組大鼠大腦白質(zhì)及海馬內(nèi)的髓鞘結(jié)構(gòu)完整且致密。
　　4

7、. Western blot檢測(cè)結(jié)果顯示：OVX+E組大鼠大腦白質(zhì)、海馬中MBP的含量均顯著高于OVX+Veh組(P＜0.05)。免疫組化結(jié)果顯示，與OVX+Veh組相比，OVX+E組大鼠大腦白質(zhì)及海馬內(nèi)的Lingo-1的分布均明顯減少
　　5.Western blot和免疫組化檢測(cè)結(jié)果顯示：OVX+E組大鼠大腦白質(zhì)、海馬中Lingo-1的含量及分布均顯著低于OVX+Veh組(P＜0.05)。
　　結(jié)論：
　　為期1個(gè)