PVL新生大鼠神經(jīng)細胞凋亡及腦組織Lingo-1 mRNA表達變化.pdf

1、[目的]： 在建立新生鼠腦室周圍白質(zhì)軟化(periventricular leukomalacia，PVL)模型基礎(chǔ)上，觀察新生鼠正常及PVL時神經(jīng)膠質(zhì)細胞凋亡及神經(jīng)再生抑制因子lingo-1的mRNA表達變化，探討Lingo-1在PVL損傷抑制機制中的意義，為研究早產(chǎn)兒腦損傷發(fā)病機制奠定一定基礎(chǔ)。 [方法]： 將160只2日齡新生SD大鼠隨機分為2組，假手術(shù)組(74只)和PVL模型組(86只)。缺氧缺血后假手術(shù)

2、組死亡2只，PVL模型組死亡14只，故兩組均為72只。采用Back等方法建立新生大鼠PVL模型，分別于缺氧缺血后0h、8h、24h、48h、72h、7d處死動物。灌注后取腦組織常規(guī)石蠟包埋，切片，HE染色，應(yīng)用DAPI染色方法檢測缺氧缺血后不同時間點神經(jīng)細胞凋亡的變化；應(yīng)用熒光定量RT-PCR測定缺氧缺血后腦組織不同時間點Lingo-1mRNA的表達變化。 [結(jié)果]： 1．腦組織HE染色光鏡觀察：假手術(shù)組細胞排列有序、胞

3、核大、胞漿少、左右側(cè)腦室對稱。PVL組缺氧缺血后24h即見紋狀體內(nèi)膠質(zhì)細胞水腫；48h出現(xiàn)核固縮、胼胝體細胞稀疏、排列紊亂；72h可見側(cè)腦室旁白質(zhì)呈廣泛疏松；7d可見側(cè)腦室旁呈篩網(wǎng)狀壞死。 2．細胞凋亡檢測：假手術(shù)組大鼠腦室周圍白質(zhì)紋狀體區(qū)、胼胝體區(qū)有少量神經(jīng)細胞凋亡；PVL組大鼠紋狀體和胼胝體有更多神經(jīng)細胞凋亡，凋亡指數(shù)(apoptosis index，AI)8h開始升高，48h達峰值，至72h有下降，仍高于對照組水平，與假手

4、術(shù)組比較P均<0.05，之后下降明顯，7d與假手術(shù)組比較差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.05)。 3．Lingo-1mRNA的表達變化：假手術(shù)組大鼠腦組織中Lingo-1mRNA表達oh高于7d(P<0.05)，差異有統(tǒng)計學(xué)意義。余各時段無明顯變化，差異無統(tǒng)計學(xué)意義。PVL組大鼠腦組織中Lingo-1mRNA表達8h開始升高，48h達到高峰，與對照組比較P均<0.05。72h仍高于對照組水平，之后開始下降，7d與對照組比較差異無統(tǒng)計學(xué)

5、意義(P>0.05)。 [結(jié)論]： 1．采用單側(cè)結(jié)扎新生2日齡SD大鼠右側(cè)頸總動脈，經(jīng)低氧處理后，大鼠感覺運動功能及生長發(fā)育均較假手術(shù)組明顯減退，HE染色后光鏡形態(tài)學(xué)觀察發(fā)現(xiàn)腦室周圍紋狀體和胼胝體區(qū)改變顯著，證實模型建立成功。 2．PVL新生大鼠腦組織中神經(jīng)細胞凋亡水平呈現(xiàn)先上升后下降的趨勢，且具有明顯時序性，推測神經(jīng)細胞凋亡參與了PVL整個病理過程。 3．假手術(shù)組新生大鼠腦組織中Lingo-1 mRNA