β-細辛醚對Glu損傷PC12細胞的保護及其對NMDAR亞型表達影響.pdf

1、目的:
　　探討β-細辛醚對谷氨酸引起PC12細胞損傷的保護作用以及NMDA受體亞型和突觸素表達的影響。
　　方法:
　　PC12細胞分為正常組，模型組和治療組組，正常組用無血清DMEM培養(yǎng)基培養(yǎng)，模型組用含50mM谷氨酸的無血清DMEM培養(yǎng)，治療組用10μM的β-細辛醚與含50mM谷氨酸的無血清DMEM培養(yǎng)共同培養(yǎng)，2h后觀察電子顯微鏡下細胞形態(tài)，用cck-8檢測其活力;采用流式細胞術(shù)檢測細胞內(nèi)Ca2+、線粒體膜電位

2、（MMP）、細胞凋亡等的變化。免疫熒光技術(shù)檢測突觸素(SYP)在各組細胞中的表達，并用PCR擴增技術(shù)對其細胞內(nèi)NMDA受體亞型的基因(NR1，NR2A，NR2B，NR2C，NR2D，NR3A，NR3B) mRNA的表達進行分析。
　　結(jié)果:
　　經(jīng)谷氨酸損傷的PC12細胞與正常培養(yǎng)的細胞相比，活力明顯低于正長培養(yǎng)組細胞（P＜0.01）。與治療組比，治療組明顯活力高于模型組（P＜0.01），與正常組比，正常組活力高于治療組。通

3、過流式分析，模型組的細胞內(nèi)Ca2+濃度與正常組細胞內(nèi)Ca2+濃度相比，明顯高于正常組（P＜0.01）;與治療組相比，細胞內(nèi)Ca2+濃度略高于治療組（P＜0.05）;與正常組比，治療組Ca2+濃度無統(tǒng)計學(xué)意義（P＞0.05）。模型組線粒體膜電位與正常組相比，明顯低于正常組（P＜0.01）;與治療組比，略低與治療組（P＜0.05）;與正常組比，正常組線粒體膜電位高于治療組（P＜0.01）。模型組的細胞凋亡率與正常組比，明顯高于正常組（P＜0

4、.01）;與治療組相比，略高于治療組（P＜0.05）;與正常組比，正常組凋亡率低于治療組（P＜0.01）。通過免疫熒光技術(shù)，與正常組比，模型組細胞中SYP熒光強度明顯弱于正常組（P＜0.01），與治療組比，治療組SYP熒光強度強于模型組（P＜0.05），正常組SYP陽性細胞數(shù)相比與模型組增多（P＜0.01），SYP陽性細胞數(shù)與模型組比較多（P＜0.05）;與正常組比，治療組SYP陽性細胞數(shù)無統(tǒng)計學(xué)差異（P＞0.05）。與正常組比，模型組

5、細胞中NMDA受體亞型NR1mRNA的表達顯著低于正常組（P＜0.01），而模型組NR2A的表達也顯著低于正常組（P＜0.01）;與模型組比，治療組細胞中NR1 mRNA表達量顯著高于模型組（P＜0.01），治療組中NR2A的表達也高與模型組（P＜0.05）。與正常組比，模型組細胞中NR2B mRNA的表達低于正常組（P＜0.05），模型組中NR2C mRNA的表達顯著低于正常組（P＜0.01）;與模型組比，治療組細胞中NR2B mRN

6、A表達量高于模型組（P＜0.05），治療組中NR2C的表達高與模型組(P＜0.05)與正常組比，模型組細胞中NR2D mRNA的表達沒有統(tǒng)計學(xué)意義(P＞0.05)，而模型組NR3A mRNA的表達顯著低于正常組（P＜0.01）;與模型組比，治療組細胞中NR2D mRNA表達沒有統(tǒng)計學(xué)意義(P＞0.05)，治療組中NR3A的表達高與模型組(P＜0.05)。與正常組比，治療組中NR1、NR2B、NR2C、NR2D、NR3A mRNA的表達無