T細胞免疫球蛋白黏蛋白分子-3在慢性丙型肝炎患者體內水平變化及其意義.pdf

1、目的:全球現(xiàn)有丙型肝炎病毒(hepatitis C virus，HCV)感染者約2億人，其中慢性感染者居多。HCV感染慢性化機制尚未完全明確，但目前公認與宿主免疫功能缺陷，進而使HCV逃脫宿主免疫監(jiān)視相關。T細胞耗竭是免疫逃逸現(xiàn)象的一個重要誘因，與眾多的負性調節(jié)因子表達水平上升相關，T細胞免疫球蛋白粘蛋白分子-3(T cell immunoglobulin andmucin-domain-containing molecule-3，Ti

2、m-3)作為其中之一，與HBV、HIV等慢性感染性疾病均相關。該研究試圖通過檢測慢性丙型肝炎（chronic hepatitis C，CHC）患者體內Tim-3水平，探討Tim-3表達與HCV患者疾病發(fā)展及轉歸中的作用。
　　方法:于滄州市傳染病醫(yī)院肝病科門診及住院患者隨機選取CHC患者44例:未治療者(NoT組)20例，經(jīng)INF-α聯(lián)合利巴韋林抗病毒治療獲得持續(xù)病毒學應答患者(SVR組)13例，經(jīng)抗病毒治療后復發(fā)患者(Rel組)

3、11例，同時隨機選取在本醫(yī)院健康體檢者15例為健康對照組。收集各組研究對象常規(guī)生化學指標，如白蛋白(albumin，ALB)、丙氨酸轉移酶(alanine transaminase，ALT)、天冬氨酸轉移酶(aspartate transam inase，AST)、總膽紅素(total bilirubin，TB)、直接膽紅素(direct bilirubin，DB)等，檢測各組患者HCV-RNA水平，并應用ELISA法檢測血清Tim-3

4、水平及IFN-γ水平。其中13例患者（未治療患者3例，獲得SVR患者5例，未獲得SVR患者5例）經(jīng)肝組織活檢留取肝組織標本，免疫組織化學檢測肝組織內Tim-3表達，并通過實時熒光定量PCR檢測肝組織Tim-3mRNA表達水平。CHC診斷符合中華醫(yī)學會感染病學分會、中華醫(yī)學會傳染病與寄生蟲病學分會聯(lián)合頒布的《丙型肝炎防治指南》。
　　結果:1.研究對象年齡、性別比等人口學指標間無差異，具有可比性。CHC各組患者ALB(NoT組32.

5、1±3.2 g/L，SVR組35.2±4.2 g/L，Rel組32.2±2.9g/L)水平明顯低于健康對照組（43.8±5.5 g/L），ALT水平(NoT組31.1±8.7 U/L，SVR組30.1±7.9 U/L，Rel組30.2±8.2 U/L)明顯高于健康對照組（18.5±7.3 U/L），差異具有統(tǒng)計學意義，P＜0.05或0.01。NoT組患者TB水平（17.9±7.4μmol/L）較健康對照組（11.3±6.5μmol/L）

6、明顯升高，差異具有統(tǒng)計學意義，P＜0.05。
　　2.NoT、Rel組患者血清Tim-3水平明顯高于SVR組及健康對照組。應用酶聯(lián)免疫吸附法測定各組研究對象血清Tim-3水平。NoT組患者血清Tim-3水平（474.3±152.5 pg/ml）及Rel組(473.9±144.5 pg/ml)間無明顯差異，且均明顯高于獲得SVR患者組（176.3±108.8 pg/ml）及健康對照組患者（56.0±56.9 pg/ml），差異均具有

7、統(tǒng)計學意義，P＜0.05或0.01。SVR組患者血清Tim-3水平與健康對照組無明顯差異。
　　3.獲得SVR患者血清IFN-γ水平明顯高于其他各組患者。應用雙抗體夾心酶聯(lián)免疫吸附法測定各組患者血清IFN-γ水平，SVR組患者血清IFN-γ含量（1164.0±344.5 pg/ml）明顯高于NoT組（378.1±106.0 pg/ml）及Rel組（375.7±132.4 pg/ml）及健康對照組（390.8±157.9 pg/ml

8、），差異具有統(tǒng)計學意義，P均＜0.01。其余各組間血清IFN-γ水平無明顯差異。
　　4.SVR患者肝組織Tim-3+細胞計數(shù)明顯低于Rel組。共計對3名NoT組患者、5名SVR組患者及5名Rel組患者肝組織標本進行了免疫組織化學檢測各觀察對象肝組織中Tim-3+細胞計數(shù)。SVR組患者肝組織標本中Tim-3+細胞計數(shù)(10.6±1.2/hpf)明顯低于Rel組(26.5±2.8/hpf)，差異具有統(tǒng)計學意義，P＜0.01。NoT組

9、肝組織內Tim-3+細胞計數(shù)(22.0±3.9/hpf)與其余兩組間無明顯差異。
　　5.SVR患者肝組織Tim-3 mRNA水平明顯低于NoT組及Rel組。應用實時熒光定量PCR法檢測3名NoT組患者、5名SVR組患者及5名Rel組患者肝組織內Tim-3 mRNA水平，SVR組患者肝組織內Tim-3mRNA水平(1.0)明顯低于NoT組患者（2.8±0.2）及Rel組患者（2.8±0.3），差異具有統(tǒng)計學意義，P均＜0.05。<