蝦青素產生菌的篩選鑒定及其轉化子的研究.pdf_第1頁
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文檔簡介

1、本課題從來源不同的腐葉土壤中分離出蝦青素產生菌株J1、J2、J3、J4、J5，通過真菌形態(tài)和發(fā)酵產物的鑒定，初步認為它們同屬于紅酵母。經過進一步的篩選得到高產菌株J3，它的蝦青素含量為397.0μg/gCDW。利用18SrRNA分子技術，根據真核生物18SrDNA保守區(qū)段設計出兩條引物,經過PCR體系擴增出大小為1774bp18SDNA序列，其G+C含量為46.96％，在Genebank中，進行比對分析，進一步確定該菌株J3是粘紅酵母，

2、并命名為粘紅酵母SJ。　　通過電轉化技術，以2.0kV、25μF、200Ω作脈沖轉化的條件下，將雨生紅球藻的基因組DNA導入粘紅酵母SJ中，并以二苯胺，硫酸銅為篩選模型，獲得了色素含量772μg/gCDW的轉化子，是親本粘紅酵母SJ色素含量的1.95倍。應用微生物形態(tài)學和RAPD技術，對轉化子的遺傳背景進行鑒定。　　為了證實轉化子產量穩(wěn)定性，進行了連續(xù)八代產量穩(wěn)定性試驗。結果表明：第4代最高，第1代最低，兩者生物量相差4.83％、色

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