靜脈應用bFGF對心肌缺血再灌注大鼠心功能及VEGF表達的影響.pdf

1、目的：急性心肌梗死（AMI)是心肌缺血性壞死，目前，治療AMI會導致心肌缺血再灌注損傷（MIRI），構建在體大鼠急性心肌I/R模型，觀察靜脈應用堿性成纖維細胞生長因子（bFGF）對心肌缺血再灌注大鼠心功能及血管內皮生長因子（VEGF）蛋白表達的影響。
　　方法：取雄性Wistar大鼠(250g-300g)80只，隨機分為5組：1、假手術(sham，n=16)組；2、缺血再灌注(I/R組, n=16)；3、I/R+bFGF50（bF

2、GF50：50μg/kg尾靜脈注射, n=16）組；4、I/R+bFGF100(bFGF100：100μg/kg經尾靜脈注射, n=16)組；5、I/R+bFGF200（bFGF200：200μg/kg經尾靜脈注射, n=16)組。I/R組為結扎前降支（LAD）30min，再灌注4h。I/R+bFGF組在心臟LAD結扎30min后，于再灌注前10min經尾靜脈注射bFGF，bFGF溶于0.5ml生理鹽水。sham組只放置結扎線，不結扎L

3、AD血管。模型建立后，進行下述實驗：1、分別在再灌注4h后，每一組取出8只大鼠頸椎脫臼處死，取出心臟，中性福爾馬林固定后12h，制作蠟塊，用檢測心肌組織細胞凋亡的TUNEL法檢測各組大鼠細胞凋亡率。2、各組剩余的8只大鼠繼續(xù)飼養(yǎng)4周，心臟超聲觀察各組大鼠心功能參數(shù);Western blot法定量各組大鼠心肌組織VEGF的表達量；Masson染色測定各組大鼠心肌纖維化的程度。
　　結果：1、I/R組大鼠12只（75％）發(fā)生室性心律失

4、常，4只（25%）發(fā)生心室顫動。bFGF干預各組室性心律失常的發(fā)生率低于I/R組（均p<0.05），I/R+bFGF50組12只（75%）出現(xiàn)室性心律失常，2只（12.5%）發(fā)生心室顫動；I/R+bFGF100組10只（62.5%）出現(xiàn)室性心律失常，2只（12.5%）發(fā)生心室顫動；I/R+bFGF100組10只（62.5%）出現(xiàn)室性心律失常，2只（12.5%）發(fā)生心室顫動；I/R+bFGF200組6只（37.5%）出現(xiàn)室性心律失常，1只

5、（6.25%）發(fā)生心室顫動。bFGF干預組存活率為62.5%,I/R組存活率為32%。表明bFGF干預可以減少I/R大鼠室性心律失常的發(fā)生。2、I/R組心肌細胞凋亡率顯著高于sham組[（29.09±2.41）%/(5.43±1.58)%, p<0.05]；與I/R組[（29.09±2.41）%]相比，I/R+bFGF50、I/R+bFGF100和I/R+bFGF200各組心肌細胞凋亡率分別為[(24.90±4.43)%、(16.04±

6、1.99)%和(13.39±1.64)%，均 p<0.05]有所下降；與I/R+bFGF50組相比，I/R+bFGF100、I/R+bFGF200組心肌細胞凋亡率明顯下降(p<0.05)；I/R+bFGF200組心肌細胞凋亡率低于I/R+bFGF100組(p<0.05)；可見bFGF可以抑制心肌細胞凋亡，并且與bFGF的劑量相關，bFGF劑量越高，細胞凋亡率越低。3、各組心功能參數(shù)的變化：和sham組，左室射血分數(shù)（LVEF）[（81.

7、90±7.13）%]相比，I/R組和bFGF各處理LVEF分別[(49.10±6.36)%,(55.6±6.22)%,(69.8±4.25)%,(77.37±5.69%)，均p<0.05]有所下降；與I/R組[(49.10±6.36)%]相比，I/R+bFGF100, I/R+bFGF200組LVEF分別[(69.8±4.25)%,(77.37±5.69)%，均p<0.05]有所好轉；I/R+bFGF200與 I/R+bFGF100組相

8、比， LVEF[(77.37±5.69)%/(69.8±4.25)%, p<0.05]。可見bFGF對LVEF的影響具有劑量依賴性，劑量越高改善越明顯。與sham組左室收縮末期內徑（LVIDs）[(4.11±0.85)mm]相比，I/R組和bFGF各處理組LVIDs分別為[(6.28±0.64)mm,(5.89±0.59)mm,（5.55±1.13）mm,(4.48±0.60)mm，均p<0.05]有所增大；與I/R組[(6.28±0.

9、64)mm]相比,各bFGF處理組LVIDs分別為[(5.89±0.59)mm,（5.55±1.13）mm,(4.48±0.60)mm，均p<0.05]逐漸減??；與I/R+bFGF50組[(5.89±0.59)mm]相比，I/R+bFGF100,I/R+bFGF200處理組分別為[（5.55±1.13）mm,(4.48±0.60)mm, p<0.05]均降低。與sham組左室舒張末期內徑（LVIDd）[(4.04±0.28)mm]相比，

10、I/R組和bFGF各處理組LVIDd分別為[(6.73±0.78mm)(6.61±0.85)mm,(6.21±1.00)mm,(5.07±0.64)mm,均p<0.05]有所增高;與I/R組[(6.73±0.78)mm]相比，I/R+bFGF100,I/R+bFGF200組LVIDd分別為[(6.21±1.00)mm,(5.07±0.64)mm,p<0.05]降低;I/R+bFGF200與I/R+bFGF100組相比，[(5.07±0.

11、64)mm/(6.21±1.00)mm，p<0.05]也有所降低?？梢婋S著bFGF劑量的增加可以逐漸改善左室功能。4、心肌組織VEGF蛋白表達的比較：與sham組比較，I/R組、I/R+ bFGF50組、I/R+bFGF100組和I/R+bFGF200組VEGF蛋白的表達顯著增加(均p<0.05)；與I/R組相比，I/R+bFGF50組，I/R+bFGF100組和I/R+bFGF200組VEGF蛋白的表達增加(均p<0.05)；與I/R

12、+bFGF50組相比，I/R+bFGF100組和I/R+bFGF200組VEGF蛋白的表達增加(p<0.05)；I/R+bFGF200組和I/R+bFGF100組相比，VEGF表達增強(p<0.05)?？梢奲FGF能增加心肌組織中VEGF蛋白的表達，并具有劑量依賴性。5、各組心肌纖維化程度（心肌膠原容積分數(shù)（CVF）的比較：與sham組CVF[(1.29±0.71)%]比較，I/R組、I/R+ bFGF各組CVF分別為[(45.51±3

13、.92)%,(21.56±1.79)%,(15.61±1.45)%,(9.76±1.19)%，均p<0.05]心肌纖維化程度顯著加重；與I/R組[(45.51±3.92)%]相比，I/R+bFGF各組，分別為[(21.56±1.79)%,(15.61±1.45)%,(9.76±1.19)%,均p<0.05]纖維化顯著減少；與I/R+bFGF50組相比，I/R+bFGF100組和I/R+bFGF200組纖維化程度明顯減輕。
　　結論