I3C通過調控p53泛素化對喉癌Hep-2細胞凋亡的影響.pdf

1、目的:本研究就I3C對人喉癌Hep-2細胞凋亡及其與 p53/MDM2的蛋白表達水平的變化之間的關系，闡明I3C對喉癌細胞的作用機制，為喉癌治療的藥物篩選提供理論依據。
　　方法:本文采用RPM1640培養(yǎng)基行喉癌Hep-2細胞的培養(yǎng)。運用 MTT比色法，檢測了不同時間點(0、12h、24h、72h)不同濃度的I3C（0μM、75μM、150μM）對Hep-2細胞存活率的影響；運用半定量RT-PCR法，檢測150μM的I3C對He

2、p-2處理72h后細胞內p53、MDM2、BAX及Bcl-2 mRNA的表達情況；運用Western Blotting法，檢測150μM的I3C對Hep-2處理72h后細胞內p53、MDM2、BAX及Bcl-2蛋白的表達，探討其抑制Hep-2細胞增殖的具體作用機制。
　　結果：
　　1．MTT結果顯示，與對照組(T0)相比,給藥組細胞的OD值隨藥物作用時間的延長而降低(P<0.05)；給藥后的同一時間點，高濃度組（150μM

3、）細胞的OD值均低于低濃度組（75μM），具有統(tǒng)計學差異(P<0.05)
　　2．PCR結果顯示，使用150μM的I3C作用于Hep-2細胞72h后，與對照組相比，細胞內MDM2及Bcl-2 mRNA的表達降低（P<0.05），而p53及BAX mRNA的表達增高（P<0.05）。
　　3．Western Blotting結果顯示，使用150μM的I3C作用于Hep-2細胞72h后，與對照組相比，細胞內MDM2及Bcl-2蛋