SpltMNPV重組病毒的構(gòu)建和SpltMNPV-JP-G-,1-2- iap基因的克隆.pdf

1、蘇州大學(xué)碩士學(xué)位論文SpltMNPV重組病毒的構(gòu)建和SpltMNPV-JP-G iap基因的克隆姓名：薛貴收申請(qǐng)學(xué)位級(jí)別：碩士專業(yè)：農(nóng)業(yè)昆蟲(chóng)與害蟲(chóng)防治指導(dǎo)教師：浦冠勤20090501C o n s t r u c t i o n o f S p l t M N P V r e c o m b i n a n t v i r u sa n d C l o n e o f i a p G e n e i nS p l t M N P V -

2、 J P —G 1 ．2A b s t r a c tS p o d o p t e r a l i t u r a ( ( L e p i d o p t e r a ：N o c t u i d a e ) ) i s o n eo f t h e m o s t s e r i o u s p e s ta r o u n dt h ew o r l d ．T h e y a r eh i g h l yp o l y p h a

3、 g o u s ，a t t a c k i n g3 8 9s p e c i e s e s ，1 0 9f a m i l i e so f a g r i c u l t u r a lc r o p s a n dg r e e n i n gp l a n t s ．R e c e n t l y , c h e m i c a lp e s t i c i d e sa r ef r e q u e n t l yu s

4、 e dt oc o n t r o lp e s tb u t h a sl i t t l ee f f e c t ．C o n s i d i n g t op r o t e c tt h ee n v i r o n m e n t a la n dt ob a l a n c ee c o l o g i c a le n v i r o n m e n t , S p o d o p t e r al i t u r a

5、m u l t i c a p s i dn u c l e o p o l y h e d r o v i r u s( S p l t M N P V ) h a sb e e n d e v e l o p e da s ac o m m e r c i a lb i o p e s t i e i d e t o c o n t r o l t h ec r o pi n s e c t si nt h e w o r l d

6、．H o w e v e r ，S p l t M N P Va l s oh a sd e f m i t er e s t r i c t i o n s i no u t d o o r sc o n d i t i o n ，a s l o w i s h s p e e d o nk i l l i n gp e s ta n d m o r eq u a n t i t ya n d n a r r o wh o s ts

7、p e c i f i c i t yl i m i tt o u s ei nl a r g e s c a l e ．I no r d e rt o s o l v et h ea b o v ep r o b l e m s ，o n eo ft h em o s ta p p r o a c h e st oi m p r o v et h ei n s e c t i c i d a l p r o p e r t i e s

8、o fS p l t M N P V i s b ym e a n s o fg e n e t i ce n g i n e e r i n ga n dm o l e c u l a rb i o l o g yt ol a c k a c e r t a i ng e n e a n de x p r e s s t h eg e n eo ft h eli i j 6 s e c t ．s e l e c t i v et o

9、x i n s ．T h es e q u e n c eo fS p l t M N P V - J P ·G I - 2 卸g e n ew a sc l o n e d a n da n a l y s e d i nt h i sr e s e a r c h ．S p l t M N P V - J P ·G I ．2a n dG 1 0 - 3w e r er e c o m b i n e da n d

10、an e w r e c o m b i n a n tv i r e sW a sc o n s t r c u c t e db yl a c k i n go f p o l ho r e g t g c n e a n d i n s e r t i n gi n s e c t - s e l e c t i v e t o x i nB m k 1 T a la n de g f p u n d e r t h ep p h

11、 p r o m o t e r ．T h e m a i nc o n c l u s i o n sa r ea sf o l l o w e d ：1 ．T h e ／a pg e n eW a s c l o n e d f r o mS p l t M N P V - J P ·G I ．2s t r a i ng e n o m e ．T h i s g e n et h a th a sb e e ns u b

12、m i t r e dt ot h eN C B I G e n B a n k a n dt h ea c c e s s i o nn u m b e r s i sF J 3 8 4 6 6 8 ．I t ’S4 1lb pl o n ga n dp o t e n t i a l t oe n c o d e 13 6a m i n oa c i d s ，ap o l y p e p t i d ew i t l lp r e

13、 d i c t e dm o l e c u l a rw e i g h to f15 ．6 7k D ．A n a l y z i n g n u c l e o t i d ea n d a m i n oa c i ds e q u e n c eo f g e n e／a pi nS p l t M N P V J a p a n e s e s t r a i n ( G 1 ．z ) w a sd o n e a tt

14、h em o l e c u l a r b i o l o g i c a ll e v e l ．2 ．G e n e t i ce n g i n e e r i n ga n d m o l e c u l a rb i o l o g ya p p r o a c h e sh a v eb e e nd e v e l o p e d t oe n h a n c et h ei n s e c t i c i d a l