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文檔簡介
1、目的:觀察滋陰抑亢調(diào)沖湯對卵巢過度刺激綜合征(ovarian hyperstimulation syndrome,OHSS)模型大鼠體重、卵巢重量、腹腔毛細(xì)血管通透性、血清雌二醇(estradiol,E2)含量、血清腫瘤壞死因子α(tumor necrosis factor-alpha,TNF-α)含量及卵巢組織TNF-α蛋白表達(dá)的影響,并比較滋陰抑亢調(diào)沖湯與吲哚美辛對卵巢過度刺激綜合征的治療效果,進(jìn)一步探討滋陰抑亢調(diào)沖湯治療卵巢過度刺
2、激綜合征可能的療效及其作用機(jī)制。
方法:選用60只未成熟的22日齡Wistar雌鼠(SPF級),隨機(jī)分為正常對照組、模型對照組、滋陰抑亢調(diào)沖湯組和吲哚美辛組4組,每組15只。正常對照組在第22~26日齡,連續(xù)5d經(jīng)皮下注射生理鹽水0.1mL·d-1;其余三組均按照改良的Ujioka方法從第22日齡起連續(xù)4d每日皮下注射孕馬血清促性腺激素(pregnant mare serum gonadotropin,PMSG)10IU,于第
3、26日齡,皮下注射人絨毛膜促性腺激素(human chorionic gonadotropin,hCG)100IU,在未成年鼠體內(nèi)建立OHSS模型。各組均在第26日齡開始灌胃,滋陰抑亢調(diào)沖湯組采用中藥滋陰抑亢調(diào)沖湯灌胃4.25g/(100g·d),吲哚美辛組采用吲哚美辛0.5mg/(100g·d)灌胃,正常對照組、模型對照組用等量生理鹽水灌胃1mL·d-1,四組均予以連續(xù)灌胃1周。在33日齡時(shí)給各組大鼠稱重,麻醉大鼠,亞甲藍(lán)0.1ml尾
4、靜脈注射,30分鐘后從心臟采血,隨后處死大鼠,正中剖開腹腔,收集腹腔沖洗液,剖取大鼠卵巢稱重,制作卵巢組織病理切片,肉眼、光鏡觀察卵巢組織形態(tài)學(xué)改變,檢測腹腔沖洗液中亞甲藍(lán)含量,采用放射免疫法檢測大鼠血清雌二醇(E2)水平、酶聯(lián)免疫法(ELISA)檢測血清腫瘤壞死因子α(TNF-α)的含量,免疫組化法檢測卵巢組織TNF-α蛋白的表達(dá)。
結(jié)果:1.用改良的Ujioka方法成功建立OHSS大鼠模型,模型對照組、滋陰抑亢調(diào)沖湯組、吲
5、哚美辛組的卵巢較正常對照組均顯著增大,表面呈紫褐色,呈多囊性改變,卵巢濕重均較正常對照組重(P<0.01),模型大鼠體內(nèi)出現(xiàn)腹水,腹腔沖洗液亞甲藍(lán)含量明顯高于正常對照組(P<0.01),提示腹腔毛細(xì)血管通透性增加,表明OHSS模型成功建立。
2.正常對照組、模型對照組、滋陰抑亢調(diào)沖湯組、吲哚美辛組四組大鼠體重比較無統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P>0.05);滋陰抑亢調(diào)沖湯組、吲哚美辛組的卵巢重量較模型對照組均明顯下降(P<0.01),滋陰抑亢
6、調(diào)沖湯組、吲哚美辛組的卵巢重量比較無統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P>0.05)。
3.吲哚美辛組、滋陰抑亢調(diào)沖湯組大鼠腹腔沖洗液亞甲藍(lán)含量均顯著低于模型對照組(P<0.01),滋陰抑亢調(diào)沖湯組大鼠腹腔沖洗液亞甲藍(lán)含量明顯低于吲哚美辛組(P<0.05),提示滋陰抑亢調(diào)沖湯降低腹腔毛細(xì)血管通透性方面更優(yōu)于吲哚美辛。
4.與正常對照組相比,模型對照組、吲哚美辛組、滋陰抑亢調(diào)沖湯組大鼠血清E2水平均明顯升高(P<0.01);滋陰抑亢調(diào)沖湯組
7、、吲哚美辛組大鼠血清E2水平明顯低于模型對照組(P<0.01或P<0.05);滋陰抑亢調(diào)沖湯組大鼠血清E2水平雖低于吲哚美辛組,但兩組相比無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。
5.模型對照組血清TNF-α水平、卵巢組織TNF-α蛋白表達(dá)均較正常對照組明顯升高(P<0.05),吲哚美辛組、滋陰抑亢調(diào)沖湯組血清TNF-α水平、卵巢組織TNF-α蛋白表達(dá)均低于模型對照組(P<0.05),滋陰抑亢調(diào)沖湯組血清TNF-α水平、卵巢組織TNF-
8、α蛋白表達(dá)低于吲哚美辛組,但兩組相比無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。
6.光鏡下正常對照組大鼠卵巢可見各個(gè)發(fā)育階段的卵泡;模型對照組大鼠卵巢明顯腫脹,在卵巢皮質(zhì)內(nèi)可見部分發(fā)育期卵泡,多發(fā)性的卵泡囊腫及黃體囊腫,黃素化明顯伴間質(zhì)水腫;與模型對照組相比,吲哚美辛組、滋陰抑亢調(diào)沖湯組大鼠卵巢形態(tài),卵泡囊腫及黃體囊腫數(shù)目,均有不同程度的減輕。
結(jié)論:1.PMSG聯(lián)合hCG可成功建立OHSS大鼠模型。
2.滋陰抑亢調(diào)沖
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