冠心病患者外周血M2巨噬細(xì)胞水平變化及其極化的相關(guān)信號(hào)通路.pdf

1、目的：通過(guò)檢測(cè)冠心病患者與正常對(duì)照組巨噬細(xì)胞特異性M2標(biāo)志物 CD163的表達(dá)情況，分析其與不同冠心病組的相關(guān)性，并探討 M2巨噬細(xì)胞極化可能的信號(hào)通路，為進(jìn)一步提高粥樣斑塊的穩(wěn)定性進(jìn)而改善冠心病患者的冠脈缺血事件的發(fā)生提供一定的依據(jù)。
　　方法：選取2014年9月至2015年8月在南華大學(xué)附屬第二醫(yī)院心血管內(nèi)科住院的冠心病病人110例，其中穩(wěn)定型心絞痛（SAP）組38例，非ST段抬高急性冠脈綜合征（NSTEACS）組37例，ST

2、段抬高型急性心肌梗死（STEMI）組35例。正常對(duì)照組（control）32例來(lái)自于同階段南華大學(xué)附屬第二醫(yī)院體檢中心各項(xiàng)生化指標(biāo)無(wú)明顯異常的入選者。入院時(shí)抽取各組外周靜脈血標(biāo)本，分離出單核細(xì)胞， Western blot法分別檢測(cè)各組單核細(xì)胞中CD163水平及p-STAT3、STAT3蛋白表達(dá)。另取control組外周血標(biāo)本，經(jīng)離心分離獲得純化的單核細(xì)胞，培養(yǎng)形成巨噬細(xì)胞，用IL-4和IL-13誘導(dǎo)M2巨噬細(xì)胞的形成，其中經(jīng)不同濃度的

3、STAT3特異性抑制劑Stattic（30μmo/L、15μmol/L、10μmol/L、5μmol/L）處理的設(shè)為實(shí)驗(yàn)組（a，b，c，d組），在巨噬細(xì)胞經(jīng)IL4/IL13處理誘導(dǎo)M2巨噬細(xì)胞形成過(guò)程中不加入Stattic的設(shè)為空白對(duì)照組（e組）。對(duì)各組培養(yǎng)后的細(xì)胞經(jīng)離心分離后Western blot法測(cè)定M2巨噬細(xì)胞標(biāo)志物CD163的表達(dá)。
　　結(jié)果：
　　1.經(jīng)與β-Actin比較，CD163相對(duì)值在control組為（

4、2.34±0.083）、SAP組為（2.28±0.096）、NSTEACS組為（1.49±0.071）、STEMI組為（0.85±0.041），經(jīng)方差分析，組間差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）。進(jìn)一步兩兩比較，除SAP組與control組的差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義以外（P>0.05），其余各組間的差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）。
　　2.經(jīng)與β-Actin比較，p-STAT3相對(duì)值在control組為（2.66±0.066）、SAP組

5、為（2.58±0.052）、NSTEACS組為（0.98±0.035）、STEMI組為（0.36±0.021），經(jīng)方差分析，組間差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）。進(jìn)一步兩兩比較，除SAP組與control的差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義以外（P>0.05），其余各組間的差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）；而STAT3蛋白在control組及冠心病各組間比較，經(jīng)方差分析組間差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05）。
　　3.經(jīng)加入不同濃度的抑制劑Stat

6、tic對(duì)M2巨噬細(xì)胞極化進(jìn)行處理，檢測(cè)巨噬細(xì)胞CD163的表達(dá)，與β-Actin比較，其相對(duì)值在a、b、c、d、e各組分別0.56±0.018、0.85±0.022、1.12±0.026、1.18±0.017、2.65±0.025,經(jīng)方差分析，除c、d兩組間的差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義外（P>0.05），其余各組間的差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）。
　　結(jié)論：
　　1.M2巨噬細(xì)胞在穩(wěn)定動(dòng)脈粥樣斑塊中具有一定的作用；
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