硅殼熒光納米顆粒與細(xì)胞相互作用的研究及其在溶酶體標(biāo)記中的應(yīng)用.pdf

1、近年發(fā)展起來(lái)的具有制備簡(jiǎn)單、分散性好的硅殼生物納米顆粒為生命過(guò)程機(jī)制的闡明、人類疾病機(jī)理的研究、臨床醫(yī)學(xué)診斷和治療提供了全新的技術(shù)和方法。本研究小組已在硅殼生物納米顆粒的制備及其在生物醫(yī)學(xué)領(lǐng)域中的應(yīng)用等方面取得了突破性的進(jìn)展，并對(duì)硅殼生物納米顆粒的制備機(jī)理和生物親和性等進(jìn)行了系統(tǒng)的研究和深入的探討，但是有關(guān)硅殼納米顆粒與細(xì)胞相互作用及細(xì)胞吞噬硅殼納米顆粒生物學(xué)機(jī)制的基礎(chǔ)性研究還沒(méi)有文獻(xiàn)報(bào)道。本論文瞄準(zhǔn)這一重要研究方向，開(kāi)展了硅殼熒光納米

2、顆粒與細(xì)胞相互作用的研究工作，并在此基礎(chǔ)上首次將SiO2熒光納米顆粒應(yīng)用于細(xì)胞器溶酶體的標(biāo)記。 (1)、細(xì)胞吞噬表面電荷不同的硅殼熒光納米顆粒的研究以表面帶負(fù)電荷的SiO2熒光納米顆粒和表面帶正電荷的氨基化SiO2熒光納米顆粒為代表，利用硅殼熒光納米顆粒的熒光信號(hào)同步指示作用，考察了HepG、MCF-7和L-02細(xì)胞對(duì)表面電荷不同的硅殼納米顆粒的吞噬。細(xì)胞對(duì)表面電荷不同的硅殼納米顆粒的吞噬依賴于納米顆粒的濃度和培育時(shí)間，并受納米

3、顆粒表面電荷以及細(xì)胞培養(yǎng)基中血清的影響，這為有針對(duì)性地對(duì)硅殼熒光納米顆粒的表面進(jìn)行修飾或改性，提高顆粒在細(xì)胞培養(yǎng)介質(zhì)中的穩(wěn)定性，使其更好地用于細(xì)胞生物學(xué)領(lǐng)域提供了理論依據(jù)。 (2)、HeLa細(xì)胞吞噬SiO2熒光納米顆粒生物學(xué)機(jī)制的初步探討在第一部分研究工作的基礎(chǔ)上，針對(duì)HeLa細(xì)胞吞噬SiO2熒光納米顆粒的生物學(xué)機(jī)制進(jìn)行了初步探討。HeLa細(xì)胞對(duì)SiO2熒光納米顆粒吞噬是一個(gè)依賴于納米顆粒初始濃度和培育時(shí)間并逐漸達(dá)到飽和的耗能過(guò)

4、程；同時(shí)，高滲透壓的蔗糖溶液、無(wú)K+緩沖液、微管抑制劑nocodazole都抑制了HeLa細(xì)胞對(duì)SiO2熒光納米顆粒的吞噬。所以，HeLa細(xì)胞對(duì)SiO2熒光納米顆粒的吞噬是在液相內(nèi)吞和吸附內(nèi)吞二者共同的作用下完成的。同時(shí)，細(xì)胞中的微管對(duì)控制納米顆粒在胞內(nèi)的運(yùn)轉(zhuǎn)過(guò)程中起到了一定的作用。 (3)、基于SiO2熒光納米顆粒的新型溶酶體標(biāo)記物在第二部分探討HeLa細(xì)胞吞噬SiO2熒光納米顆粒生物學(xué)機(jī)制的基礎(chǔ)上，我們進(jìn)一步考察了SiO2熒