2種減肥藥物的聯(lián)合分析及芬氟拉明在中毒大鼠體內(nèi)的分布研究.pdf

1、目的：
　　1.研究建立生物檢材中鹽酸芬氟拉明和鹽酸西布曲明的聯(lián)合分析測(cè)定方法。
　　2.建立大鼠灌胃芬氟拉明急性中毒模型,研究芬氟拉明在體內(nèi)分布規(guī)律。
　　3.通過其分布規(guī)律及特點(diǎn),為相關(guān)案件的法醫(yī)鑒定工作提供實(shí)踐依據(jù);同時(shí)也為保健食品中是否違法添加芬氟拉明提供簡(jiǎn)便、可靠的分析方法。
　　方法：
　　1.分析方法的建立
　　待測(cè)生物樣品堿化后,以乙酸乙酯液-液萃取,氣相色譜法(GC)進(jìn)行檢測(cè)。色譜條

2、件:TR-5MS毛細(xì)管柱;柱溫:三階段程序升溫,初始溫度為80℃,持續(xù)2min,以13℃/min升溫至190℃,再以5℃/min升至210℃,最后以13℃/min升至270℃,繼續(xù)1min;FID檢測(cè)器;進(jìn)樣口、檢測(cè)器溫度均為280℃;不分流/分流進(jìn)樣,分流比為20:1,進(jìn)樣后0.2min分流;進(jìn)樣量1μL。
　　2.定性、定量分析
　　利用芬氟拉明及西布曲明標(biāo)準(zhǔn)品的保留時(shí)間(tr值)定性。配制混合藥物的標(biāo)準(zhǔn)工作溶液系列,用

3、氣相色譜法進(jìn)行分析,分別以混合標(biāo)準(zhǔn)樣品濃度、相關(guān)峰面積為橫坐標(biāo)和縱坐標(biāo),計(jì)算其線性回歸方程,用于檢材中芬氟拉明和西布曲明濃度的定量分析。
　　3.分布研究
　　雄性SD大鼠隨機(jī)分為每組六只的實(shí)驗(yàn)組與對(duì)照組。實(shí)驗(yàn)組大鼠灌胃芬氟拉明的劑量為兩倍大鼠LD50(LD50為122mg/kg);對(duì)照組大鼠灌胃等量生理鹽水。灌胃30min后處死實(shí)驗(yàn)組大鼠,取心血、尿液、腦、心、肺、肝、脾、腎與肌肉檢材,分別檢測(cè)芬氟拉明含量。對(duì)照組大鼠的樣

4、品作為空白對(duì)照。經(jīng)過相關(guān)數(shù)據(jù)處理后得出芬氟拉明在大鼠體內(nèi)的分布規(guī)律。
　　結(jié)果：
　　1.檢測(cè)結(jié)果
　　在所建立的氣相色譜分析方法中,芬氟拉明和西布曲明完全分離,出峰良好,保留時(shí)間分別為5.8min和12.8min,內(nèi)源性物質(zhì)對(duì)檢測(cè)無干擾。血、尿、肝中芬氟拉明和西布曲明定量檢測(cè)的線性范圍均為1.0-150.0μg/mL(或μg/g),線性關(guān)系良好。最低檢測(cè)限為0.2μg/mL(S/N≥3)?；厥章蕯?shù)據(jù)均在95.8％-1

5、05.0%之間,日內(nèi)、日間相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差都小于5.5%。
　　2.中毒表現(xiàn)
　　灌胃給藥后實(shí)驗(yàn)組大鼠出現(xiàn)精神躁動(dòng),隨著時(shí)間延長(zhǎng)肌肉震顫,易受外界聲音刺激,呼吸頻率加快,30min后未死亡。對(duì)照組未見明顯異常。
　　3.藥物分布情況
　　急性中毒大鼠的體液和各臟器中芬氟拉明的分布排序?yàn)?肺>肝>脾>腎>腦>尿液>心>肌肉>血液。
　　結(jié)論：
　　1.本實(shí)驗(yàn)建立的氣相色譜分析方法可以同時(shí)測(cè)定芬氟拉明和西布曲