基于轉(zhuǎn)錄激活的細菌雙雜交載體的構(gòu)建.pdf_第1頁
已閱讀1頁，還剩65頁未讀， 繼續(xù)免費閱讀

下載本文檔

版權(quán)說明：本文檔由用戶提供并上傳，收益歸屬內(nèi)容提供方，若內(nèi)容存在侵權(quán)，請進行舉報或認領

文檔簡介

1、大腸桿菌雙雜交系統(tǒng)是繼酵母雙雜交系統(tǒng)和哺乳動物細胞雙雜交系統(tǒng)之后，產(chǎn)生的另一種直接于細胞內(nèi)檢測蛋白質(zhì)與蛋白質(zhì)相互作用的遺傳學新方法。本研究希望構(gòu)建基于轉(zhuǎn)錄激活的細菌雙雜交系統(tǒng)載體，并且進一步發(fā)展高通量的細菌雙雜交載體。其主要內(nèi)容： (1)將細菌雙雜交誘餌載體pBT、獵物載體pTRG的克隆方式進行改進。最初的系統(tǒng)是BacterioMatch(R)Ⅱtwohybridsystem，為了能高通量地將誘餌、獵物基因克隆到相應載體上，而且

2、能利用實驗室現(xiàn)有的大量引物，將兩載體作出了改進：在多克隆位點處兩端依次引入現(xiàn)有引物中的長15bp的同源序列BF、NR，兩個酶切位點BglⅡ、NotⅠ，中間為一個帶強啟動子Prrn的gfp作為反選擇標記。改進的誘餌載體和獵物載體分別命名為pBT-BN-GFP，pTRG-BN-GFP。 基因片段經(jīng)PCR擴增后，與用BglⅡ、NotⅠ酶切的誘餌載體混合，無需用連接酶進行連接反應，直接轉(zhuǎn)化大腸桿菌。多基因可以平行操作，無需考慮基因內(nèi)的酶

溫馨提示

  • 1. 本站所有資源如無特殊說明，都需要本地電腦安裝OFFICE2007和PDF閱讀器。圖紙軟件為CAD,CAXA,PROE,UG,SolidWorks等.壓縮文件請下載最新的WinRAR軟件解壓。
  • 2. 本站的文檔不包含任何第三方提供的附件圖紙等，如果需要附件，請聯(lián)系上傳者。文件的所有權(quán)益歸上傳用戶所有。
  • 3. 本站RAR壓縮包中若帶圖紙，網(wǎng)頁內(nèi)容里面會有圖紙預覽，若沒有圖紙預覽就沒有圖紙。
  • 4. 未經(jīng)權(quán)益所有人同意不得將文件中的內(nèi)容挪作商業(yè)或盈利用途。
  • 5. 眾賞文庫僅提供信息存儲空間，僅對用戶上傳內(nèi)容的表現(xiàn)方式做保護處理，對用戶上傳分享的文檔內(nèi)容本身不做任何修改或編輯，并不能對任何下載內(nèi)容負責。
  • 6. 下載文件中如有侵權(quán)或不適當內(nèi)容，請與我們聯(lián)系，我們立即糾正。
  • 7. 本站不保證下載資源的準確性、安全性和完整性, 同時也不承擔用戶因使用這些下載資源對自己和他人造成任何形式的傷害或損失。

最新文檔

評論

0/150

提交評論