一種被毛孢菌絲體提取物的免疫調(diào)節(jié)活性研究.pdf

1、近年來，大量研究表明蟲生真菌雖然是一個(gè)小的類群，但是卻能代謝出多種結(jié)構(gòu)獨(dú)特，功能特異的生物活性物質(zhì)，具有較大的應(yīng)用前景，因此蟲生真菌的代謝產(chǎn)物的研究近年來受到廣泛的關(guān)注。
　　 在一次多菌株的蟲生真菌生物活性篩選中，發(fā)現(xiàn)一株被毛孢菌株RCEF0851發(fā)酵物具有較強(qiáng)的免疫增強(qiáng)作用，本試驗(yàn)就是在此基礎(chǔ)上展開了進(jìn)一步的研究，采用熒光定量PCR方法研究RCEF0851不同提取物對(duì)體外培養(yǎng)小鼠巨噬細(xì)胞RAW264.7的IL-1β、IL-6

2、和TNF-α的轉(zhuǎn)錄水平的影響。
　　 結(jié)果表明，乙酸乙酯提取物能顯著提高小鼠巨噬細(xì)胞TNF-a轉(zhuǎn)錄水平的表達(dá)，但對(duì)細(xì)胞因子IL-1β和IL-6作用不明顯。乙酸乙酯提取物的濃度為300ug/mL和600ug/mL時(shí)細(xì)胞因子的2-△△Ct值比濃度為150ug/mL時(shí)的高；相同濃度乙酸乙酯提取物和細(xì)胞培養(yǎng)不同時(shí)間后，和細(xì)胞共培養(yǎng)12 h和24h的2-△△Ct值比和細(xì)胞共培養(yǎng)6h高；雖然乙酸乙酯提取物能顯著提高TNF-a轉(zhuǎn)錄水平的表達(dá)，

3、但與細(xì)胞共培養(yǎng)12 h和24h的TNF-a轉(zhuǎn)錄水平表達(dá)量變化則不大。
　　 不同濃度水提物和細(xì)胞培養(yǎng)同樣時(shí)間后，都顯示細(xì)胞IL-1β的分泌隨著濃度逐漸變大其2-△△Ct值逐漸升高，但是在水提物濃度為600ug/mL和300ug/mL時(shí)，2-△△Ct值變化的幅度已經(jīng)不是很明顯；相同濃度水提物和細(xì)胞培養(yǎng)不同時(shí)間后，和細(xì)胞共培養(yǎng)12 h和24h的2-△△Ct值區(qū)別不大，但是比和細(xì)胞共培養(yǎng)6h高。水提物能顯著提高細(xì)胞TNF-a的分泌且濃

4、度和處理時(shí)間對(duì)其影響不大。
　　 不同濃度甲醇提取物和細(xì)胞培養(yǎng)同樣時(shí)間后，其2-△△Ct值基本相差不大，且相對(duì)于DMSO對(duì)照變化不明顯，顯示濃度的變化對(duì)細(xì)胞IL-1β的分泌影響不大；相同濃度甲醇提取物和細(xì)胞培養(yǎng)不同時(shí)間后，和細(xì)胞共培養(yǎng)12 h比和細(xì)胞共培養(yǎng)6 hIL-1β的2-△△Ct顯著升高。不同濃度的甲醇提取物和細(xì)胞培養(yǎng)同樣時(shí)間后，相對(duì)于DMSO對(duì)照變化不明顯，而且濃度的變化對(duì)細(xì)胞IL-6的分泌影響不大；相同濃度甲醇提取物和