大豆種子萌發(fā)的蛋白質(zhì)組研究.pdf

1、運(yùn)用蛋白質(zhì)組學(xué)技術(shù)對大豆(Glycine max)N2899種子萌發(fā)0h、8h、36h、60h四個(gè)時(shí)期蛋白質(zhì)的差異表達(dá)情況進(jìn)行了研究。結(jié)果發(fā)現(xiàn)，在考染的雙向電泳pH3-10的膠上，PDQuest圖像分析軟件可識別的點(diǎn)約350個(gè)，其中表達(dá)量變化2倍以上的蛋白點(diǎn)有31個(gè)，而絕大部分大豆種子貯藏蛋白在萌發(fā)期尚未降解。在萌發(fā)的第一階段，31個(gè)差異蛋白中有13個(gè)蛋白的豐度發(fā)生變化；第二階段，差異蛋白的種類和表達(dá)量增加，其中21個(gè)蛋白是動態(tài)變化的；

2、17個(gè)蛋白在胚根突破種皮時(shí)表達(dá)量達(dá)到峰值，表明吸脹后種子內(nèi)的生命活動越來越強(qiáng)。對這31個(gè)差異蛋白點(diǎn)進(jìn)行膠內(nèi)酶解，用基質(zhì)輔助激光解析電離飛行時(shí)間質(zhì)譜測定均獲得肽質(zhì)量指紋圖譜。搜索大豆的UniGene庫初步鑒定出7個(gè)蛋白，分別是球蛋白A<,1a> B<,1b>亞基、核苷二磷酸激酶、3-磷酸甘油醛脫氫酶、熱激蛋白、硫氧還蛋白、35kDa種子成熟蛋白及種子成熟蛋白PM36。本文對這些蛋白在種子萌發(fā)過程中可能的作用進(jìn)行了討論。 采用相同

3、的方法研究了非致死濃度100mM NaCl處理下Lee68和N2899種子萌發(fā)的差異表達(dá)蛋白。pH3-10的2-D膠上可檢測到的點(diǎn)約350個(gè)，而pH4-7的2-D膠上檢測到約650個(gè)蛋白點(diǎn)，其中18個(gè)蛋白點(diǎn)鹽處理后表達(dá)量發(fā)生變化，搜索大豆的UniGene庫初步鑒定出9個(gè)蛋白，如鐵蛋白、20S蛋白酶體B亞基、GST 9、GST 10、種子成熟蛋白PM36等，表明其在鹽脅迫種子萌發(fā)的防御體系中具有重要的作用。同時(shí)我們還測定了鹽脅迫下萌發(fā)種子