X射線吸收光譜學與晶體學結合的鋅金屬蛋白酶Acutolysin-A和Acutolysin-C酶活中心結構與功能研究.pdf

1、本論文的研究晶體學是目前研究蛋白質結構的最主要手段，而XAS方法在金屬蛋白中的金屬格點結構研究方面有著獨特的優(yōu)勢。蛋白質晶體學可以完整的測定生物大分子結晶態(tài)的整體三維結構，而XANES定量化分析可以給出溶液態(tài)蛋白分子的金屬位點更為精確的局域結構。本文采用蛋白質晶體學(PX)與X射線吸收光譜學(XAS)相結合的方法，系統(tǒng)測定了不同pH值下的鋅金屬蛋白酶Acutolysin-A的晶體結構和Acutolysin-C的鋅中心溶液態(tài)局域結構以及其

2、pH7．5下的晶體結構，為研究蛋白水解酶活性機理提供了精確而豐富的結構信息基礎。 BioXAS已經發(fā)展為一個專門的研究領域，這方面的報道也已經很多。然而，前人的研究工作集中于EXAFS方法和定性的使用XANES方法，無法得到金屬格點周圍定量的立體結構信息。MXAN的出現使得從金屬蛋白的XANES譜出發(fā)得到金屬格點的局域精細結構成為可能，極大的提升了BioXAS的研究能力。然而，由于這種方法的專業(yè)性，使得XANES定量化分析的實