鐮形扇頭蜱IgG結合蛋白基因的克隆及表達.pdf

1、蜱是一類專性吸血的體外寄生蟲，分布廣泛，是許多人和動物重要疾病的傳播媒介，經蜱傳播的病原體有細菌、病毒、真菌、立克次體、螺旋體以及原蟲，不僅給畜牧業(yè)造成很大的經濟損失，同時還影響人類健康。目前世界上約有820多種蜱，我國發(fā)現(xiàn)的蜱有110多種，鐮形扇頭蜱是我國南方的優(yōu)勢蜱種，主要傳播牛巴貝斯蟲病、馬巴貝斯蟲病和吉氏巴貝斯蟲病。蜱及蜱傳播疾病引起的經濟損失十分巨大，到目前為止，免疫防治被認為是最有潛力的防治策略，而尋找敏感、長效、安全的抗原

2、基因是免疫防治的前提條件。IgG結合蛋白(IgG binding protein,IGBP)是蜱體內的一種重要蛋白質，主要存在于蜱的血淋巴和唾液腺中，可以結合進入蜱血淋巴中的宿主免疫球蛋白，避免了宿主免疫球蛋白對蜱內部囂官的損害，有些種類的IGBP具有雄性特異性，是雄蜱協(xié)助雌蜱順利完成吸血所必不可少的，IGBP是蜱體內一種具有疫苗潛力的功能分子。 本實驗以鐮形扇頭蜱吸血前后雄蜱唾液腺的抑制消減雜交cDNA文庫中的EST數(shù)據(jù)為基礎

3、，應用RACE方法從鐮形扇頭蜱體內克隆出一個IGBP基因的全長序列，該基因全長683bp，編碼178個氨基酸，預測分子量為19.5kDa，經同源性比較該基因與具尾扇頭蜱的IGBP-MB基因序列的同源性高達92％。用RT-PCR方法分析了該基因表達的性別特異性、各個器官、各個發(fā)育階段的表達情況，結果表明，該基因表達沒有性別特異性；IGBP基因在唾液腺、殼這兩個器官有所表達，但在腸中卻沒有表達；在蜱的各個發(fā)育階段均有表達。成功構建了重組表達