清醒大鼠SNP誘發(fā)急性低血壓后谷氨酸鹽在MVN-NTS-RVLM投射中的作用.pdf

1、外周前庭器官位于內(nèi)耳，可感知軀體運(yùn)動(dòng)和頭部所在空間位置，并經(jīng)前庭神經(jīng)核引起前庭-脊髓、前庭-眼球和前庭-自主反射。前庭-自主反射又稱(chēng)為前庭-內(nèi)臟反射。壓力感受性反射是調(diào)節(jié)血壓的重要的神經(jīng)調(diào)節(jié)形式。另外，外周前庭器官把所感受的信號(hào)經(jīng)第八對(duì)腦神經(jīng)中的前庭神經(jīng)傳入到經(jīng)前庭神經(jīng)核（vestibular nucleus，VN），以后將經(jīng)過(guò)經(jīng)典的心血管的壓力感受性反射來(lái)影響血壓。孤束核(solitary tract nucleus，NTS)接收來(lái)自

2、各種中樞神經(jīng)系統(tǒng)的傳入信號(hào)，包括來(lái)自前庭復(fù)合核的傳入信息。在機(jī)體姿勢(shì)改變過(guò)程中，身體通過(guò)前庭交感反應(yīng)調(diào)節(jié)軀體血液的分布。延髓頭端腹外側(cè)區(qū)（Rostra ventrolateral medullar，RVLM）可以整合來(lái)自NTS、室旁核等核團(tuán)的傳入信息，并將信息傳遞到脊髓中間外側(cè)柱的交感節(jié)前神經(jīng)元，通過(guò)對(duì)交感神經(jīng)系統(tǒng)的興奮或抑制來(lái)完成對(duì)心血管活動(dòng)的調(diào)節(jié)。本科室以往的研究發(fā)現(xiàn)，正常大鼠誘發(fā)急性低血壓后，RVLM內(nèi)c-Fos和pERK1/2免

3、疫陽(yáng)性神經(jīng)元表達(dá)明顯增加，而雙側(cè)迷路破壞的大鼠誘發(fā)急性低血壓后，RVLM內(nèi)陽(yáng)性神經(jīng)元表達(dá)明顯減少，表明急性低血壓引起RVLM內(nèi)神經(jīng)元興奮的過(guò)程中有外周前庭器官的參與。但此過(guò)程中MVN與NTS和RVLM之間的功能聯(lián)系尚未明確，并且離子型谷氨酸受體在急性低血壓興奮MVN過(guò)程中發(fā)揮的重要作用，是否同樣影響急性低血壓對(duì)NTS和RVLM的興奮作用，尚未見(jiàn)相關(guān)報(bào)道。
　　本研究在清醒和麻醉動(dòng)物，去除竇弓神經(jīng)（sinoaortic denerv

4、ation，SAD）后，利用藥理學(xué)和免疫組織化學(xué)的方法和技術(shù)，探討了前庭性血壓調(diào)控中，是否有NTS與RVLM的參與，并探討了谷氨酸的部分離子型受體在其中的作用，力圖闡明前庭器官-MVN-NTS-RVLM這一前庭性心血管調(diào)節(jié)通路存在的可能性。
　　實(shí)驗(yàn)結(jié)果：
　　1.SAD動(dòng)物的一般狀態(tài)：去除竇弓神經(jīng)的大鼠活動(dòng)明顯減少，攝食、攝水量也明顯減少。SAD大鼠的血壓與正常動(dòng)物相比較并無(wú)明顯的變化，但血壓并不穩(wěn)定，易受外界環(huán)境變化的影

5、響。
　　2.在麻醉大鼠，向MVN和NTS區(qū)分別注射ACSF、Lidocaine、NMDA、AMPA、MK801和CNQX前后血壓均很平穩(wěn)，無(wú)明顯變化。但在靜脈灌注SNP后血壓明顯下降，與給藥前比較差異顯著（P<0.001）。
　　3.在清醒大鼠，向MVN內(nèi)注射ACSF后，誘發(fā)急性低血壓，NTS區(qū)pERK1/2和c-Fos免疫陽(yáng)性神經(jīng)元的表達(dá)均很明顯，但是注射Lidocaine的實(shí)驗(yàn)組，pERK1/2和 c-Fos陽(yáng)性神經(jīng)元

6、表達(dá)的密度與對(duì)照組相比明顯下降，其差異顯著（P<0.001，n=6）。
　　4.向MVN內(nèi)注射N(xiāo)MDA型谷氨酸受體阻斷劑MK801后，誘發(fā)低血壓，明顯地抑制NTS區(qū)的pERK1/2和 c-Fos陽(yáng)性神經(jīng)元的表達(dá)（P<0.001，n=6）。
　　5.向MVN內(nèi)注射AMPA型谷氨酸受體阻斷劑CNQX后，誘發(fā)低血壓，NTS區(qū)的pERK1/2和 c-Fos陽(yáng)性神經(jīng)元的表達(dá)明顯地受到抑制（P<0.001，n=6）。
　　6.向

7、MVN內(nèi)注射 NMDA型谷氨酸受體激動(dòng)劑 NMDA后，NTS區(qū)的pERK1/2和c-Fos陽(yáng)性神經(jīng)元的密度顯著高于注射ACSF的對(duì)照組，而且差異顯著（P<0.001，n=6）。
　　7.在ACSF組NTS區(qū)的pERK1/2和c-Fos陽(yáng)性神經(jīng)元的表達(dá)密度較低，而向MVN內(nèi)注射AMPA型谷氨酸受體激動(dòng)劑AMPA后，NTS區(qū)的pERK1/2和c-Fos陽(yáng)性神經(jīng)元密度明顯增高，組間比較差異顯著（P<0.001，n=6）。
　　8.

8、向NTS區(qū)注射Lidocaine后，靜脈注射SNP誘發(fā)急性低血壓時(shí)，RVLM內(nèi)的pERK1/2和c-Fos陽(yáng)性神經(jīng)元密度與ACSF組相比均有明顯的下降（P<0.001，n=6）。
　　9.向NTS區(qū)微量注射MK801后，RVLM區(qū)的pERK1/2和c-Fos免疫陽(yáng)性神經(jīng)元的密度明顯的降低，與對(duì)照組比較有顯著差異（P<0.001，n=6）。
　　10.向NTS區(qū)微量注射CNQX后，也能使RVLM內(nèi)的pERK1/2和c-Fos免

9、疫陽(yáng)性蛋白表達(dá)明顯的降低（P<0.001，n=6）。
　　11.向NTS區(qū)注射谷氨酸受體激動(dòng)劑NMDA，明顯增加RVLM區(qū)pERK1/2和c-Fos免疫陽(yáng)性神經(jīng)元的表達(dá)，與其對(duì)照組比較有顯著性差異（P<0.001，n=6）。
　　12.向NTS內(nèi)注射谷氨酸受體激動(dòng)劑AMPA后，RVLM區(qū)的pERK1/2和c-Fos陽(yáng)性神經(jīng)元密度均明顯的增大，并具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.001，n=6）。
　　結(jié)論：
　　1．前庭性