根瘤菌特化類菌體繁殖能力的研究.pdf

1、根瘤菌NGR234(Rhizobium sp..NGR234)是一種廣宿主的根瘤菌，可以在近170多中植物上結(jié)瘤。本文選取了大翼豆(Macroptilium lathyoides)、扁豆(Lablabpurpureus)、豇豆(Vigna unguculata)、白灰毛豆(Tephrosia candida)和大豆(Glycinemax)五種植物進(jìn)行了NGR234的結(jié)瘤實(shí)驗(yàn)。實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示大翼豆可以在大翼豆、扁豆、豇豆和白灰毛豆上結(jié)瘤，而

2、在大豆上不能結(jié)瘤。其中在可以結(jié)瘤的四種植物中，NGR234在大翼豆、扁豆和豇豆中可以結(jié)有效瘤，而在白灰毛豆上結(jié)的是不能固氮的無效瘤。 為了更進(jìn)一步地確定結(jié)瘤情況和進(jìn)一步的了解根瘤菌在根瘤中的形態(tài)，本研究還采用電子顯微鏡對(duì)根瘤的超薄切片進(jìn)行了觀察。根據(jù)電子顯微鏡照片顯示大翼豆、扁豆和豇豆的根瘤細(xì)胞中含有較多的根瘤菌類菌體，而白灰毛豆根瘤細(xì)胞中只含有較少的根瘤菌。扁豆、豇豆和大翼豆中的類菌體形態(tài)都以棒狀為主。大翼豆和扁豆根瘤中的類菌

3、體含有較多的不著色顆粒PHB，而豇豆中的類菌體基本不含PHB。 本研究還對(duì)大翼豆的根瘤中類菌體的繁殖能力進(jìn)行了研究。從接種4周開始每周取一個(gè)根瘤進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。將采集的根瘤表面滅菌后，在離心管中壓碎，用無菌水稀釋后分成2份，一份用細(xì)菌計(jì)數(shù)器計(jì)數(shù)得到根瘤中的細(xì)菌總數(shù)作為根瘤中的類菌體總數(shù)，另一份稀釋涂布計(jì)數(shù)得到的CFU數(shù)目作為可以繁殖的類菌體數(shù)目，進(jìn)而得到根瘤中類菌體的繁殖率。從實(shí)驗(yàn)結(jié)果可以看出隨著根瘤年齡的增加，其中類菌體的繁殖率是逐

4、漸增大的。并且將接種11周的植物置于暗室中培養(yǎng)一周后，人為達(dá)到衰敗的根瘤，測(cè)衰敗根瘤中類菌體的繁殖率結(jié)果顯示衰敗根瘤中類菌體的繁殖率比暗室培養(yǎng)之前的根瘤中類菌體的繁殖率提高了數(shù)倍。這個(gè)結(jié)果間接說明了處于衰敗期的根瘤中的類菌體可以再分化成為具有繁殖能力的細(xì)胞。 為了更進(jìn)一步證實(shí)類菌體的再繁殖能力，還將大翼豆根瘤壓碎得到根瘤汁稀釋后將根瘤汁進(jìn)行顯微微室培養(yǎng)，微室培養(yǎng)的片子在顯微鏡下定點(diǎn)觀察單一類菌體的繁殖生長(zhǎng)情況，通過不同時(shí)期的根瘤