BMP9對骨微環(huán)境中非小細(xì)胞肺癌A549細(xì)胞的影響及機(jī)制研究.pdf

1、目的：探討骨形態(tài)發(fā)生蛋白9（bone morphogenetic protein9, BMP9）對骨微環(huán)境中非小細(xì)胞肺癌A549細(xì)胞的作用及其機(jī)制研究，為肺癌的診斷和治療提供新的標(biāo)志物和實(shí)驗(yàn)基礎(chǔ)。
　　方法：采用qRT-PCR、western blot法分別檢測人肺腺癌細(xì)胞A549和正常支氣管上皮細(xì)胞HBE中BMP9的mRNA、蛋白表達(dá)水平。用重組腺病毒AdBMP9感染A549細(xì)胞，qRT-PCR和western blot法驗(yàn)證B

2、MP9的變化；應(yīng)用MTT、流式細(xì)胞術(shù)、劃痕愈合和Transwell侵襲實(shí)驗(yàn)分別檢測各組細(xì)胞的增殖、凋亡、遷移和侵襲等生物學(xué)特性，并用western blot檢測增殖、凋亡及遷移相關(guān)蛋白的變化。應(yīng)用Transwell小室構(gòu)建A549與骨髓基質(zhì)細(xì)胞HS-5的共培養(yǎng)體系，AdBMP9感染A549細(xì)胞，用MTT、劃痕愈合和Transwell侵襲實(shí)驗(yàn)分別檢測各組細(xì)胞生物學(xué)特性的變化；并用qRT-PCR和 western blot檢測遷移及破骨相關(guān)

3、因子IL-6、IL-8的mRNA和蛋白水平；western blot檢測MAPK、PI3K/AKT和 NF-κB通路的激活情況。在體內(nèi)，構(gòu)建裸鼠皮下成瘤和脛骨轉(zhuǎn)移模型，分別檢測BMP9對肺癌瘤體生長及骨轉(zhuǎn)移的影響。
　　結(jié)果：BMP9在A549細(xì)胞中的表達(dá)低于HBE細(xì)胞；過表達(dá)BMP9明顯抑制了A549細(xì)胞的增殖、遷移和侵襲，并促進(jìn)其凋亡能力。A549與HS-5細(xì)胞共培養(yǎng)后，A549細(xì)胞的增殖、遷移和侵襲能力有所增加，且IL-6、

4、IL-8的mRNA和蛋白水平及p-ERK、p-P65表達(dá)均升高；共培養(yǎng)體系中過表達(dá)BMP9明顯抑制了HS-5對A549細(xì)胞的促進(jìn)作用。在體內(nèi)，HS-5促進(jìn)A549細(xì)胞的成瘤能力，BMP9抑制了A549細(xì)胞的皮下成瘤及對骨的溶骨損傷。
　　結(jié)論：過表達(dá)BMP9能明顯抑制A549細(xì)胞的增殖、遷移和侵襲能力，并促進(jìn)其凋亡；骨髓基質(zhì)細(xì)胞HS-5促進(jìn)了A549細(xì)胞的增殖、遷移和侵襲能力，BMP9亦能抑制HS-5對A549細(xì)胞的促進(jìn)作用；其機(jī)