斑馬魚Spr2互作蛋白的篩選和功能初步研究.pdf

1、山東師范大學碩士學位論文斑馬魚Spr2互作蛋白的篩選和功能初步研究姓名：譚效忠申請學位級別：碩士專業(yè)：動物學指導教師：安利國20070406山東師范大學碩士學位論文斑馬魚Spr2互作蛋白的篩選和功能初步研究中文摘要斑馬魚是一種耨興的模式生物，近十幾年來，以斑馬魚為模式生物的研究在脊椎動物胚胎發(fā)育的研究領域獲得了長足進展。斑馬魚作為模式生物有著不可替代的優(yōu)勢，它價格便宜，容易獲得，體積小、易密集飼養(yǎng)。斑馬魚的胎間距僅為3個月，雌性斑馬魚每

2、周可產(chǎn)生大量后代，其胚胎的受精及發(fā)育都在母體外進行，受精卵大，早期胚胎完全透明，即使在發(fā)育的高級階段，仍然可以觀察到全部的細胞。斑馬魚胚胎發(fā)育非常迅速，從受精到孵出大約3d，主要器官都在受精后24h內(nèi)形成，在胚胎發(fā)育時期，其體型不會發(fā)生多大變化；而且，來自于同一母體的胚胎是同步發(fā)育的，易于大量收集特定階段的同期胚胎材料。目前一種新的手段——注射反義嗎啉環(huán)寡聚核苷酸以抑制某一特定基因的表達的方法已經(jīng)在斑馬魚上得到了很好的應用。此外，斑馬魚

3、基因組的測序工作也已經(jīng)完成。因此，我們也以斑馬魚作為模式生物，對其胚胎發(fā)育過程中重要的蛋白因子Spr2進行分子生物學方面的研究工作。spr2是斑馬魚胚胎發(fā)育過程中在中胚層和外胚層中特異表達的基因，基因全長為1981bp，最大編碼框為1075bp。它可編碼一種Spl—like轉(zhuǎn)錄因子家族成員。Spl1ike轉(zhuǎn)錄因子家族與鋅指蛋白密切相關(guān)，它們可以調(diào)控大量的復合Gc一啟動子的基因，在細胞增殖、細胞凋亡、細胞分化和細胞轉(zhuǎn)化中都可能發(fā)揮作用。獨

4、立的Spl—like轉(zhuǎn)錄因子可與不同的啟動子和互作蛋白結(jié)合，發(fā)揮增強子或抑制子的作用。最新研究發(fā)現(xiàn)在斑馬魚胚胎發(fā)育的后囊胚期和前原腸胚階段，Spr2在上胚層和下胚層中表達；其后在中胚層和一些神經(jīng)組織中表達。通過spr2基因敲除實驗和過量表達實驗，可知Spr2的活性受到Fgf、Nodal、Wnt信號通路的協(xié)同控制。在中胚層發(fā)生早期，Spr2可以通過調(diào)控Fgf信號通路調(diào)控中胚層的發(fā)生，從而表達一些活性蛋白因子來調(diào)控中胚層相關(guān)組織器官的發(fā)育。