江西部分地區(qū)豬源糞腸球菌耐藥性及毒力基因檢測(cè)與分析.pdf

1、糞腸球菌以往被認(rèn)為是人類及動(dòng)物的共生菌，但近十幾年來，其引起人和動(dòng)物發(fā)生感染性疾病的報(bào)道越來越多，這主要是與其耐藥性和毒力增強(qiáng)有一定的關(guān)聯(lián)。為了解和評(píng)估該地區(qū)糞腸球菌對(duì)人和豬養(yǎng)殖業(yè)的潛在威脅，本研究通過選擇性培養(yǎng)基、PCR技術(shù)分離鑒定糞腸球菌，再對(duì)分離株進(jìn)行藥敏試驗(yàn)，最后采用PCR技術(shù)檢測(cè)糞腸球菌的相關(guān)耐藥基因及毒力基因，結(jié)果如下:
　　2014年至2015年間從江西省7個(gè)不同地區(qū)部分豬場(chǎng)采集349份新鮮豬糞樣，其中197份腹瀉糞

2、樣和152份正常糞樣。經(jīng)兩重選擇性培養(yǎng)篩選和特異性PCR擴(kuò)增確定，共分離并鑒定出226株糞腸球菌，分離率為64.8％，其中腹瀉糞便糞腸球菌分離率(72.6％)高于正常糞便分離率(54.6％)。各地區(qū)中九江地區(qū)采集的樣本分離率最高(82.2％)，宜春地區(qū)次之(80.4％)，撫州地區(qū)分離率最低(35.9％)，且各地區(qū)分離率總的來說差異顯著。
　　采用紙片擴(kuò)散法對(duì)226株豬源糞腸球菌進(jìn)行7種抗菌藥物藥敏試驗(yàn)。試驗(yàn)結(jié)果顯示，江西省豬源糞腸

3、球菌分離株多重耐藥性嚴(yán)重，多重耐藥分離株有117株(78.32％);其中分離株對(duì)紅霉素和多西環(huán)素耐藥率較高，分別為97.35％和92.48％，對(duì)環(huán)丙沙星和氟苯尼考耐藥率相對(duì)較低，分別為65.04％和61.95％，統(tǒng)計(jì)發(fā)現(xiàn)，糞腸球菌分離株對(duì)多西環(huán)素的耐藥率存在顯著性差異;本研究?jī)H在贛州地區(qū)發(fā)現(xiàn)3株對(duì)氨芐西林耐藥的菌株;未發(fā)現(xiàn)對(duì)萬古霉素或替考拉寧耐藥菌株。226株糞腸球菌分離株有14種耐藥表型，其中以紅霉素+環(huán)丙沙星+多西環(huán)素+氟苯尼考耐藥

4、表型在分離株中比較流行。
　　通過PCR方法對(duì)226株糞腸球菌分離株進(jìn)行氟苯尼考耐藥基因檢測(cè)。試驗(yàn)結(jié)果顯示，豬源糞腸球菌中攜帶fexA158株(69.91％)、cfr13株(5.75％)和fexB10株(4.42％)。在本試驗(yàn)中表型對(duì)氟苯尼考耐藥的菌株均檢出了耐藥基因，而有22株攜帶耐藥基因的菌株未表現(xiàn)出對(duì)氟苯尼考的耐藥;江西省豬源糞腸球菌分離株對(duì)氟苯尼考耐藥的機(jī)制主要是fexA基因介導(dǎo)的特異性外排機(jī)制。
　　運(yùn)用PCR方法

5、對(duì)226株糞腸球菌進(jìn)行6種毒力基因檢測(cè)，試驗(yàn)結(jié)果顯示，98.23％的糞腸球菌至少攜帶一種毒力基因，各基因檢出率由高到低依次為efaA、ace、gelE、agg、 esp和clyA。有170株(75.22％)分離株攜帶3～5種毒力基因;共檢出25種不同毒力基因型，攜帶gelE+ace+ efaA基因型的分離株在江西省較流行。對(duì)226株糞腸球菌分離株進(jìn)行β溶血和明膠溶解表型檢測(cè)，發(fā)現(xiàn)相應(yīng)的基因型和表現(xiàn)型存在不完全一致的現(xiàn)象。糞腸球菌分離株所