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1、對(duì)刺參的生殖周期進(jìn)行形態(tài)學(xué)和組織學(xué)的研究;運(yùn)用掃描及透射電鏡觀察刺參性腺發(fā)育和精卵結(jié)構(gòu)的發(fā)生過(guò)程,并總結(jié)研究討論其規(guī)律和特點(diǎn);運(yùn)用光鏡、熒光顯微鏡及掃描透射電鏡對(duì)刺參受精過(guò)程進(jìn)行了觀察描述。這些研究結(jié)果可為刺參種質(zhì)資源保護(hù)、優(yōu)良品種培育、人工繁育提供細(xì)胞學(xué)的理論參考和依據(jù)。主要內(nèi)容分為以下四個(gè)部分。 一、刺參性腺發(fā)育形態(tài)組織學(xué)觀察 根據(jù)刺參性腺的形態(tài)學(xué)和組織學(xué)特征,將刺參性腺發(fā)育分為4個(gè)時(shí)期:恢復(fù)期,增長(zhǎng)期,成熟期和
2、排放期。刺參性腺自3月份增殖期開(kāi)始,生殖小管的長(zhǎng)度、直徑逐漸增加,顏色變深,分枝增多,到成熟期達(dá)到最高水平。精卵排放后生殖小管長(zhǎng)度和直徑相應(yīng)減小,生殖管壁厚度變化則相反,自增殖期到成熟期厚度變薄,排放后又開(kāi)始增厚。刺參性腺發(fā)育在我國(guó)北方沿海為一年一個(gè)周期,產(chǎn)卵期自4月下旬到7月上旬(遼寧省),集中在5月中旬,屬于多次排精卵類型。 二、刺參精子發(fā)生的超微結(jié)構(gòu)研究 透射電鏡觀察了刺參的精子發(fā)生過(guò)程,揭示其從精原細(xì)胞到精子
3、的一系列超微結(jié)構(gòu)的變化。根據(jù)頂體發(fā)育特點(diǎn),將刺參精細(xì)胞發(fā)育分為精原細(xì)胞、精母細(xì)胞、精細(xì)胞等3個(gè)發(fā)育時(shí)期。精原細(xì)胞體積最大,有明顯核仁,出現(xiàn)前頂體顆粒。初級(jí)精母細(xì)胞略小,染色質(zhì)開(kāi)始凝集,次級(jí)精母細(xì)胞開(kāi)始出現(xiàn)尾部。精細(xì)胞時(shí)期頂體顆粒形成,線粒體極明顯的融合成一巨型線粒體。透射電鏡和掃描電鏡觀察精子結(jié)構(gòu),成熟精子為原生型,由頭部、中部、尾部組成。頭部圓形,直徑約3μ,圍繞頭的中部有一環(huán)形凹陷溝,尾部長(zhǎng)約50~60μ。核染色質(zhì)凝集成團(tuán)塊狀,中部
4、不發(fā)達(dá),線粒體融合成1個(gè)超大結(jié)構(gòu)環(huán)繞中部。尾部鞭毛橫切面為簡(jiǎn)單的“9+2”型結(jié)構(gòu)。 三、刺參卵子發(fā)生的超微結(jié)構(gòu)研究 研究卵子發(fā)生過(guò)程中細(xì)胞和細(xì)胞器的超微結(jié)構(gòu)變化,結(jié)果表明:刺參的卵子發(fā)生可劃分為卵原細(xì)胞、卵黃發(fā)生早期、卵黃發(fā)生中期及卵黃發(fā)生后期卵母細(xì)胞4個(gè)時(shí)期。卵原細(xì)胞核大而圓,胞質(zhì)內(nèi)分布有少量的線粒體和高爾基囊泡,其它細(xì)胞器不發(fā)達(dá)。卵黃發(fā)生早期的卵母細(xì)胞,胞質(zhì)中線粒體、高爾基體等細(xì)胞器發(fā)達(dá),同時(shí)隨著發(fā)育的進(jìn)行,出現(xiàn)
5、卵黃膜、合成少量卵黃粒及產(chǎn)生大量脂滴。卵黃發(fā)生中期的卵母細(xì)胞胞體迅速增大,核膜上分布大量核孔復(fù)合體,卵質(zhì)中各種細(xì)胞器活動(dòng)活躍,參與形成卵黃粒和脂滴。卵黃發(fā)生后期的卵母細(xì)胞體積增至最大,細(xì)胞器數(shù)量減少。并就卵黃發(fā)生前后卵母細(xì)胞內(nèi)部構(gòu)造的變化、意義及刺參卵子發(fā)生的特點(diǎn)作了討論。 四、刺參精子入卵過(guò)程的細(xì)胞學(xué)研究 用熒光顯微鏡、掃描及透射電鏡對(duì)刺參的成熟精、卵結(jié)構(gòu)和精子早期入卵進(jìn)行了觀察。觀察結(jié)果:精子為鞭毛型結(jié)構(gòu),頭部圓
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