柯薩奇病毒A16與小鼠病毒性心肌炎的關(guān)聯(lián)性及其藥物干預(yù)研究.pdf

1、目的：
　　經(jīng)過細胞培養(yǎng)并經(jīng)RT-PCR技術(shù)鑒定得到柯薩奇病毒A組16型病毒，使用該病毒建立小鼠病毒性心肌炎的模型，通過對病毒性心肌炎小鼠心臟組織及血清學(xué)研究探討：
　　1、病原學(xué)本身及免疫內(nèi)環(huán)境的紊亂與病毒性心肌炎的關(guān)聯(lián)。
　　2、利巴韋林在治療感染CVA16小鼠的病毒性心肌炎的適宜劑量。
　　方法：
　　1、通過細胞培養(yǎng)技術(shù)，培養(yǎng)對該病毒敏感的Vero細胞，再用其感染CVA16病毒，觀察病毒的致病變能力

2、，同時通過RT-PCR對病毒進行鑒定，將培養(yǎng)至第9代的病毒進行放大培養(yǎng)，經(jīng)離心獲得病毒上清液，進行無菌分裝，同時進行TCID50實驗檢測病毒的濃度，至此獲得已知毒力的CVA16病毒；
　　2、使用上述獲得所需的病毒去感染小鼠，實驗采用腹腔注射，建立與病毒性心肌炎有關(guān)的小鼠模型，將實驗分五組，實驗組（A組）、對照組（B組）、藥物干預(yù)高（C組）、中（D組）、低劑量組（E組），實驗過程記錄小鼠的體重、觀察小鼠四肢活動情況，分別在生后第3

3、,7,11,15天處理小鼠，獲取血清及心臟組織，將獲得的心臟組織部分進行HE染色，另外一部分心臟組織用于提取RNA，進行RT-PCR實驗，進行病毒的鑒定，獲取的血清采用ELASA試劑盒檢測血清中的IL-6數(shù)值。所得定量數(shù)據(jù)，采用隨機區(qū)組設(shè)計資料的方差分析和完全隨機設(shè)計資料的方差分析進行統(tǒng)計學(xué)分析。
　　結(jié)果：
　　1、經(jīng)RT-PCR鑒定所獲病毒為CVA16，并且經(jīng)TCID50計算出該病毒的濃度是106TCID50/ml；

4、r>　　2、小鼠的體重隨著日齡增加，對照組小鼠體重及適宜劑量利巴韋林藥物干預(yù)后較實驗組小鼠體重增加的更明顯，而高劑量及低劑量干預(yù)后與實驗組小鼠沒有明顯的改善；
　　3、小鼠的血清IL-6值是先升高，在第7天時最高，后逐漸降低的趨勢，并且較正常組有明顯升高；
　　4、感染CVA16小鼠的心肌組織病理切片中可見明顯的心肌炎性病變，適宜劑量利巴韋林干預(yù)的心肌炎癥有明顯好轉(zhuǎn)，高劑量及低劑量利巴韋林藥物干預(yù)后，心肌炎癥較實驗組無明顯改