ERβ-p-ERβ在小鼠發(fā)情周期和早期妊娠卵巢中表達與分布的研究.pdf

1、雌激素（estrogens）在哺乳動物生殖內(nèi)分泌系統(tǒng)有著重要的作用，是最主要的內(nèi)源性激素，對雌性哺乳動物的卵巢發(fā)育、卵泡成熟具有重要的調(diào)控作用。雌激素通常是與雌激素受體（estrogen receptor，ER）結(jié)合而發(fā)揮胞內(nèi)信號轉(zhuǎn)導(dǎo)作用的，ER形成同源或異源二聚體，而在二聚體發(fā)生磷酸化后，其能夠參與核調(diào)控相關(guān)的雌激素敏感基因的啟動子活化，從而發(fā)揮生物學(xué)作用。ER是核受體超家族的重要組成成員，主要包括雌激素受體α亞型（estrogen

2、receptor alpha，Erα）和雌激素受體β亞型（estrogen receptor beta，Erβ）。兩者的表達呈現(xiàn)高度的組織特異性，而小鼠卵巢中兩者均有表達，但在表達量和生理作用上存在差異。
　　 近期實驗證實，在嚙齒類動物和人卵巢中，Erβ在轉(zhuǎn)錄水平和蛋白表達水平上均遠高于Erα的相應(yīng)指標(biāo)。而進行Erβ基因敲除的小鼠，其卵巢功能基本正常，卵泡可以發(fā)育至有腔卵泡，但排卵次數(shù)和數(shù)目卻明顯減少。這些都表明Erβ對正常卵

3、巢生理功能維持是必要的。但目前針對哺乳動物生殖系統(tǒng)中Erβ的定位表達分布研究較少，尤其是Erβ的活化形式——p-Erβ。因此以正常小鼠發(fā)情周期及妊娠期卵巢為實驗?zāi)Ｐ?，進行Erβ和p-Erβ在其中的定位表達研究，并探討該分子兩種活性狀態(tài)與卵巢功能執(zhí)行的關(guān)系是必要的。本研究能夠雌激素受體家族蛋白在卵巢中作用機制的基礎(chǔ)研究提供一定的理論和實驗依據(jù)。再者，Erβ與卵巢癌變的發(fā)生有一定關(guān)系，研究表明Erβ在卵巢腫瘤中的表達量比正常卵巢中的表達量有

4、所降低。因此，本研究在生殖系統(tǒng)腫瘤的預(yù)防、診斷和治療方面也有重要的作用和意義。
　　 本實驗以成年雌鼠卵巢為實驗材料，分別采用western blot技術(shù)和免疫組織化學(xué)方法，研究Erβ和p-Erβ在小鼠卵巢各發(fā)情周期和妊娠早期（1~11d）表達量與定位分布的變化規(guī)律。
　　 實驗結(jié)果顯示：
　　 1. 發(fā)情周期的western blot實驗結(jié)果表明：Erβ和p-Erβ在小鼠發(fā)情期卵巢中均呈現(xiàn)高水平表達，而在其它時

5、期兩者的表達量均較低，且各自相互間差異不顯著。
　　 2. 在小鼠妊娠早期的western blot實驗結(jié)果表明：處于1 d，3 d，4 d，5 d，7 d，9 d，10 d，11 d妊娠日齡的小鼠卵巢內(nèi)，在各處理中Erβ的表達水平無顯著差異；而p-Erβ的表達水平在妊娠早期1 d，3 d，4 d，5 d無顯著差異，但自7 d開始升高，而后保持在較為穩(wěn)定的水平。
　　 3. 各發(fā)情周期的免疫組織化學(xué)結(jié)果揭示，伴隨卵泡生長

6、，Erβ在卵母細胞質(zhì)、顆粒細胞中的表達量均有所升高，在卵母細胞核中并沒有分布；伴隨黃體的退化表達量下降；p-Erβ除在卵母細胞核中極強表達外，其他部位表達趨勢類似于Erβ。
　　 4. 免疫組織化學(xué)實驗結(jié)果揭示在妊娠早期各天，Erβ在黃體中高度表達并沒有顯著變化。P-Erβ在妊娠早期的黃體中的表達特點與Erβ類似，但有增加的趨勢。
　　 以上結(jié)果表明：Erβ及其磷酸化形式——p-Erβ在小鼠發(fā)情周期以及妊娠早期卵巢中表達