影響杜氏鹽藻β-胡蘿卜素合成的因素.pdf

1、本文采用無菌藻株A1系統(tǒng)研究了鹽濃度、碳源、氮源、磷酸鹽等對杜氏鹽藻生長和β-胡蘿卜素合成調控的影響；比較了一次添加型、分次添加型、不完全更換型、完全更換型四種培養(yǎng)方式和中途補給NaHCO3對鹽藻生長和累積β-胡蘿卜素的影響；利用UV輻照處理鹽藻研究藻液β-胡蘿卜素含量變化規(guī)律。 培養(yǎng)基“老化”有利于鹽藻生長,但不利于藻細胞積累β-胡蘿卜素。每兩天離心更換新鮮培養(yǎng)液,在第4,6,8,12,14天,鹽藻細胞內β-胡蘿卜素含量都大

2、于對照組,在14d時,實驗組單個藻細胞內β-胡蘿卜素含量比對照組高27.2％。NaCl濃度0.5mol/L最適宜鹽藻生長,3mol/L時鹽藻單細胞內的β-胡蘿卜素含量最高。無機碳源NaHCO3在高濃度時既適合鹽藻生長,又有利于藻細胞內β-胡蘿卜素的積累,效果比蔗糖和葡萄糖好。和NaNO3、(NH4)2SO4相比,KNO3為最佳氮源,濃度2mmol/L時最適合鹽藻生長,而0.5mmol/L有利于藻細胞內β-胡蘿卜素的積累。KH2PO4濃度

3、0.1mmol/L時單細胞內β-胡蘿卜素含量最高,0.2mmol/L最適鹽藻生長。正交實驗結果證明藻細胞生長和β-胡蘿卜素累積的最佳條件存在顯著差異。對于鹽藻細胞生長來說,碳源的影響最大,然后是氮源、磷源,最適的C、N、P濃度分別為15、2.0、0.2 mmol/L。而鹽藻細胞積累β-胡蘿卜素最主要受氮源的影響,其次是受磷源、碳源的影響,最適的C、N、P濃度分別為15、1.0、0.1 mmol/L。 比較了一次添加型、分次添加

4、型、不完全更換型和完全更換型4種培養(yǎng)方法對生長和累積β-胡蘿卜素的影響,發(fā)現完全更換型培養(yǎng)方式有利于β-胡蘿卜素的積累。另外,在鹽藻生長后期(10d)加入少量0.5mol/L的NaHCO3濃溶液促進鹽藻生長和β-胡蘿卜素的積累；隨著NaHCO3補給量的增加,培養(yǎng)液內的鹽藻濃度持續(xù)增加；當補給量達到10mmol/L時,單個藻細胞內的β-胡蘿卜素含量最高,是對照的1.43倍。 用UV對鹽藻進行輻照處理,在60s的紫外輻照范圍內,隨

5、著照射時間的延長,鹽藻藻株的存活率顯著下降。加入小魚湯后,相同的紫外輻照時間,鹽藻的存活率略有所上升；當鹽藻存活率約為10％時,輻照時間為40s,加入小魚湯后,輻照可延長至50s。經過紫外輻照處理后,前幾小時鹽藻細胞內的β-胡蘿卜素含量都有所上升,而后又緩慢下降。紫外強光輻射可以誘導鹽藻增加β-胡蘿卜素含量,并且藻細胞β-胡蘿卜素含量提高的幅度及持續(xù)的時間顯著受紫外輻照劑量影響。在40s輻照時間內,照射時間短,鹽藻細胞內β-胡蘿卜素含量