上轉(zhuǎn)發(fā)光免疫層析法檢測(cè)乙肝病毒外膜大蛋白在不同類型慢性肝病中的臨床意義.pdf

1、目的：建立上轉(zhuǎn)發(fā)光免疫層析技術(shù)(UPT-LF)檢測(cè)乙肝病毒外膜大蛋白(HBV-LP)的方法，和酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定(ELISA)法進(jìn)行比較，并分析此法用于乙肝病毒外膜大蛋白(HBV-LP)在慢性乙型肝炎(CHB)、乙肝后肝硬化(LC)、乙肝原發(fā)性肝癌(PHCC)患者血清中水平變化及血清檢測(cè)的臨床價(jià)值。
　　方法：利用上轉(zhuǎn)發(fā)光材料UCP作為示蹤劑結(jié)合免疫層析技術(shù)組裝乙肝病毒外膜大蛋白定量試紙條。利用基于上轉(zhuǎn)發(fā)光法的免疫層析檢測(cè)技術(shù)(UP

2、T)檢測(cè)260例慢性乙型肝炎、190例乙肝肝硬化及45例乙肝原發(fā)性肝癌患者血清中乙肝病毒外膜大蛋白（HBV-LP）的含量;化學(xué)發(fā)光法檢測(cè)乙肝E抗原（HBeAg）含量;實(shí)時(shí)熒光定量PCR法檢測(cè)乙肝病毒核酸（HBV DNA）。另外選取60例健康體檢者作為對(duì)照組，同時(shí)用上轉(zhuǎn)發(fā)光免疫層析法和ELISA法檢測(cè)其血清HBV-LP的含量。分析乙肝病毒外膜大蛋白(HBV-LP)檢測(cè)在不同疾病狀態(tài)的診斷中的意義。
　　結(jié)果：⑴成功建立基于上轉(zhuǎn)發(fā)光免

3、疫層析技術(shù)定量檢測(cè)HBV-LP的試紙條;產(chǎn)品相關(guān)性能檢測(cè)結(jié)果良好，最低檢測(cè)限約為0.1 U/ml，cut-off值約為1.0 U/ml，批內(nèi)與批間CV％均小于15％。⑵60例健康體檢人員血清經(jīng)UPT-LF法檢測(cè)，HBV-LP含量均小于1U/ml，特異性為100％，ELISA法檢測(cè)結(jié)果顯示59例血清標(biāo)本HBV-LP陰性，另一例陽(yáng)性，特異性為98.3％。⑶495例乙肝患者血清標(biāo)本同時(shí)采用UPT-LF法與ELISA法檢測(cè)HBV-LP，兩種方法

4、檢測(cè)總符合率為91.7％，UPT法檢測(cè)HBV-LP陽(yáng)性率為58.5％，ELISA法檢測(cè)HBV-LP陽(yáng)性率為59.5％。⑷HBV-LP陽(yáng)性結(jié)果濃度水平CHB組主要以＞40 U/ml的高濃度為主，LC組和PHCC組主要集中在＜10 U/ml的低濃度范圍內(nèi)。⑸HBeAg、 HBV DNA和HBV-LP的陽(yáng)性率均表現(xiàn)為CHB組＞LC組＞PHC組，HBeAg和HBV DNA在LC和PHCC患者中的陽(yáng)性率均明顯低于CHB患者，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜