IFN-γ的檢測(cè)及其在潛伏性結(jié)核診斷中的應(yīng)用.pdf

1、幾百年來(lái)，結(jié)核病一直困擾著人類健康和經(jīng)濟(jì)發(fā)展。世界衛(wèi)生組織調(diào)查顯示，近年來(lái)結(jié)核病在全球范圍內(nèi)發(fā)病率呈急劇上升趨勢(shì)，死亡率居傳染性疾病死亡率第二名，我國(guó)是結(jié)核病高負(fù)擔(dān)國(guó)家之一。全球有將近三分之一的人存在潛伏性結(jié)核感染(LTBI)，其中5–20％的人在兩到五年內(nèi)會(huì)發(fā)展成活動(dòng)性結(jié)核。對(duì)潛伏性結(jié)核感染患者進(jìn)行早期診斷和適當(dāng)?shù)母深A(yù)，防止其發(fā)展成為活動(dòng)性結(jié)核，是結(jié)核病防治的關(guān)鍵策略之一。目前對(duì)潛伏性結(jié)核病診斷主要基于IFN-γ的檢測(cè)。
　　本

2、文建立了兩種IFN-γ定量檢測(cè)方法：以包被有IFN-γ捕獲抗體的磁性微球?yàn)楣滔噍d體，采用HRP催化TMB顯色為檢測(cè)體系，建立了穩(wěn)定的磁酶免雙抗體夾心法定量檢測(cè)IFN-γ的方法。該方法在0-1000 pg/mL濃度范圍內(nèi)檢測(cè)線性良好，標(biāo)準(zhǔn)曲線線性公式為y=0.001x+0.0686，相關(guān)系數(shù)為0.9996，最低檢出限可達(dá)23.2 pg/mL。磁酶免的檢測(cè)方法比傳統(tǒng)的ELISA方法操作簡(jiǎn)單（只需要一步清洗），檢測(cè)時(shí)間更短（2 h），重現(xiàn)性很

3、好，并且有很大的快速、自動(dòng)化、高通量、多指標(biāo)檢測(cè)的應(yīng)用前景。另外，我們建立了AlphaLISA定量檢測(cè)IFN-γ方法，此方法在IFN-γ為0-8 IU/mL的濃度范圍內(nèi)線性非常好，擬合得到的線性方程為y=2199.8x+2073.8，標(biāo)準(zhǔn)曲線相關(guān)系數(shù) R2=0.9997，檢測(cè)低限為19.0 mIU/mL，方法的回收率為81.6%到102.1%，批間和批內(nèi)變異系數(shù)小于5%。并且，此方法的穩(wěn)定性良好，受基質(zhì)效應(yīng)影響小，反應(yīng)只需半小時(shí)。