野菊花中活性成分提取工藝及其與牛血清白蛋白相互作用研究.pdf

1、目的：利用閃式提取器提取野菊花中蒙花苷和豚草素A，以期獲得最佳提取工藝。運用多種技術(shù)手段研究野菊花中黃酮類化合物與牛血清白蛋白（BSA）相互作用，從分子水平上闡明其作用機制。
　　方法：按照三因素四水平正交試驗表，以得膏率、蒙花苷的含量、豚草素 A的含量為指標，利用閃式提取器提取野菊花中蒙花苷和豚草素A，探索最佳工藝結(jié)果。運用熒光光譜法、分子對接法、質(zhì)譜法、平衡透析法研究野菊花中木犀草素、芹菜素、刺槐素、麥黃酮、5,3’,4’-三

2、羥基-6,7-二甲氧基黃酮、5,7,4’-三羥基-6,3’,5’-三甲氧基黃酮、蒙花苷等7個黃酮類化合物與牛血清白蛋白（BSA）相互作用，測定評價其作用機理、結(jié)合常數(shù)、結(jié)合位點、結(jié)合距離、作用力類型、結(jié)合率等相關(guān)結(jié)果。
　　結(jié)果：（1）組織破碎法提取野菊花中蒙花苷和豚草素A的最佳提取工藝為65％乙醇、藥材質(zhì)量與溶劑體積比為1：10、提取3次。
　?。?）熒光猝滅法結(jié)果顯示7個黃酮類化合物都可與BSA結(jié)合得到復合物，非輻射能量

3、轉(zhuǎn)移與靜態(tài)猝滅共同導致了BSA熒光猝滅；結(jié)合位點數(shù)均約為1；7種藥物氫鍵和范德華力、疏水作用力、靜電作用力3種作用力都存在。同步熒光結(jié)果表明藥物的增加導致BSA分子中酪氨酸殘基和色氨酸殘基的熒光均被猝滅，但藥物與BSA作用的結(jié)合位點更接近于色氨酸；且部分藥物與BSA相互作用導致BSA的微環(huán)境發(fā)生變化，構(gòu)象略有改變。三維熒光光譜結(jié)果與同步相符。計算得到結(jié)合率表明在不同條件下，不同化合物結(jié)合率均在99.99%-80.00%，均屬于高結(jié)合率化

4、合物。分子對接結(jié)果表明7個黃酮類化合物均可與BSA結(jié)合，作用力與熱力學分析一致。質(zhì)譜法驗證7個黃酮類化合物可與BSA結(jié)合。
　　（3）在適宜范圍內(nèi)，pH值的小幅度變化對BSA與7種黃酮類化合物結(jié)合能力的影響很小。
　　結(jié)論：首次以得膏率、蒙花苷的含量、豚草素A的含量為評價指標進行野菊花提取工藝研究，方法高效、環(huán)保、節(jié)約成本，探索小試條件下最佳提取工藝。首次運用光譜法、分子對接法、質(zhì)譜法研究野菊花中7種結(jié)構(gòu)不同的黃酮類化合物與