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文檔簡介
1、目的:探討不同濃度的七氟醚對急性肺損傷的小鼠的肺泡灌洗液細(xì)胞中的炎癥小體(NOD-like receptor protein3,NLRP3)表達(dá)的影響,研究七氟醚對急性肺損傷小鼠的炎癥反應(yīng)是否有抑制作用.
方法:通過給每只小鼠尾靜脈注射脂多糖(Lipopolysaccharides,LPS)100μL的方法建立小鼠膿毒血癥的急性肺損傷模型。雄性健康 BALB/c小鼠50只,鼠齡6-7周,體重18-22 g,采用隨機分組的方法分
2、為5組,A組:生理鹽水對照組;B組:單純 LPS組:C組:1%七氟醚組;D組:2%七氟醚組;E組:3%七氟醚組。對于 C,D,E組的小鼠的處理為先尾靜脈注射 LPS,30 min后,用100%的氧氣配送分別給予1%、2%及3%的七氟醚吸入1 h,然后再洗脫10 min,以上五組在分別給予生理鹽水或 LPS6 h后,處死小鼠,提取小鼠的肺泡灌洗液細(xì)胞。取每組小鼠左心血,做血氣分析,得出小鼠的血氧分壓(PaO2)。取小鼠的右肺,得小鼠的肺濕
3、/干重比(W/D),使用 RT- PCR方法檢測不同組細(xì)胞中 NLRP3 mRNA的表達(dá),所得用電泳圖譜用 ImageJ軟件進(jìn)行灰度分析,所得所有數(shù)據(jù)均用 spss16.0軟件進(jìn)行統(tǒng)計學(xué)分析。
結(jié)果:1.各組小鼠動脈血氧分壓(PaO2)的變化:血氣分析結(jié)果顯示 A組PaO2的波動在100 mmHg以上。B組的小鼠的PaO2則明顯低于 A組小鼠PaO2,而 C、D、E組的小鼠 PaO2要高于 B組,但仍低于 A組。C、D、E組小
4、鼠 PaO2分別與 A組和 B組比較,P<0.05均有統(tǒng)計學(xué)意義。C、D、E組兩兩比較,P<0.05有統(tǒng)計學(xué)意義。2.各組小鼠肺濕/干重比(W/D):A組肺濕/干重比波動在3.38左右,B組與A組比較肺濕/干重比明顯增加。C、D、E組肺濕/干重比比B組底,但仍高于 A組水平。C、D、E組肺濕/干重比分別與 A組和 B組比較,P<0.05均有統(tǒng)計學(xué)意義。C、D、E組兩兩比較,P<0.05有統(tǒng)計學(xué)意義。3.各組小鼠肺泡灌洗液細(xì)胞中 NLRP
5、3 mRNA的表達(dá)強度:結(jié)果顯示,在每組小鼠肺泡灌洗液細(xì)胞中 NLRP3 mRNA均有表達(dá)。將四組細(xì)胞的RT-PCR產(chǎn)物電泳結(jié)果進(jìn)行灰度分析,B組、C組、D組和E組與正常對照A組比較,NLRP3 mRNA在小鼠肺泡灌洗液細(xì)胞中的表達(dá)均明顯上升;C組、D組和E組同B組相比,小鼠肺泡灌洗液細(xì)胞中NLRP3 mRNA表達(dá)均下降。
結(jié)論:低濃度七氟醚的吸入能降低由脂多糖誘導(dǎo)的急性肺損傷炎癥反應(yīng),其機制可能與吸入七氟醚后,肺泡灌洗液細(xì)胞
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