AllO-HSCT治療重再的臨床研究及臍帶間充質(zhì)干細(xì)胞和他克莫司在抑制GVHD中相互作用的研究.pdf

1、本文主要從以下幾部分進(jìn)行論述：
　　第一部分 異基因造血干細(xì)胞移植治療重型再生障礙性貧血的臨床研究
　　目的：
　　探討改良預(yù)處理方案用于HLA同胞全相合(MSD)、親緣單倍體相合(HFD)造血干細(xì)胞移植(HSCT)治療重型再生障礙性貧血(SAA)的安全性和可行性。
　　方法：
　　回顧性分析2011年1月至2016年6月解放軍總醫(yī)院第一附屬醫(yī)院行Allo-HSCT治療的56例SAA患者臨床資料(HFD38

2、例/MSD18例)，比較兩種移植方式對(duì)造血重建、移植物抗宿主病(GVHD)、移植相關(guān)毒性(TRT)及總生存(OS)的影響。改良FC/ATG預(yù)處理方案包括減低環(huán)磷酰胺(Cy)劑量(總量100 mg/kg)和給予第三方間充質(zhì)干細(xì)胞輸注。
　　結(jié)果：
　　56例行MSD-HSCT或HFD-HSCT的患者全部造血重建。比較中性粒細(xì)胞植入時(shí)間(P=0.58）、血小板植入時(shí)間(P=0.61）、Ⅲ-Ⅳ度aGVHD發(fā)生率(P=0.83）、廣

3、泛性cGVHD發(fā)生率(P=0.95)，重度TRT發(fā)生率(P=0.69），均顯示差別無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。隨訪32(2-66)個(gè)月，48例存活至今，HFD-HSCT組和MSD-HSCT組1年OS分別為86％和89％，差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P=0.58)。
　　結(jié)論：
　　采用改良預(yù)處理方案的Allo-HSCT治療SAA植入穩(wěn)定、毒副作用弱，GVHD發(fā)生率低，預(yù)后良好;同時(shí)對(duì)于無(wú)MSD的SAA患者，HFD-HSCT療效與MSD-HSCT相當(dāng)

4、，可以作為替代治療。
　　第二部分 臍帶間充質(zhì)干細(xì)胞與他克莫司在抑制GVHD中相互作用的研究
　　目的：
　　本實(shí)驗(yàn)擬觀察他克莫司(FK-506)對(duì)臍帶間充質(zhì)干細(xì)胞(UC-MSC)活化增殖的影響，研究FK-506與UC-MSC在免疫抑制方面作用機(jī)制及是否有協(xié)同作用。為臨床預(yù)防和治療GVHD提供一定理論基礎(chǔ)。
　　方法：
　　流式細(xì)胞儀檢測(cè)UC-MSC的表面抗原;CCK8方法檢測(cè)FK-506對(duì)UC-MSC增殖

5、的影響;流式細(xì)胞儀檢測(cè)FK-506對(duì)UC-MSC凋亡及細(xì)胞周期的影響;UC-MSC或/和不同濃度FK-506與PHA刺激的外周血單個(gè)核細(xì)胞(PBSC)共培養(yǎng)，用ELISA方法檢測(cè)培養(yǎng)上清中IFN-γ的分泌情況。
　　結(jié)果：
　　1.UC-MSC表面表達(dá)CD44、CD73、CD90、CD105、CD29，不表達(dá)CD11b、CD19、CD34、CD45、CD31、HLA-DR。
　　2.不同濃度FK-506與UC-MSC共

6、培養(yǎng)24h和48h，隨著FK-506濃度增加，UC-MSC增殖率降低，但各實(shí)驗(yàn)組與無(wú)藥對(duì)照組之間差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。
　　3.不同濃度FK-506與UC-MSC共培養(yǎng)48h，流式細(xì)胞儀檢測(cè)UC-MSC凋亡，各實(shí)驗(yàn)組與無(wú)藥對(duì)照組之間差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。
　　4.不同濃度FK-506與UC-MSC共培養(yǎng)48h，隨著FK-506濃度增加，UC-MSC細(xì)胞周期G0/G1進(jìn)入S期比例增加，各實(shí)驗(yàn)組與無(wú)藥對(duì)照組間差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。
　

7、　5.不同濃度FK-506與PHA刺激下PBSC共培養(yǎng)72h，隨著FK-506濃度增加，上清中IFN-γ減少，即IFN-γ分泌與FK-506濃度呈負(fù)相關(guān)，且無(wú)藥對(duì)照組與實(shí)驗(yàn)組之間差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。
　　6.UC-MSC與PHA刺激下PBSC不同濃度比共培養(yǎng)72h，隨著UC-MSC濃度增加，上清中IFN-γ減少，即IFN-γ分泌與UC-MSC濃度呈負(fù)相關(guān)，且各實(shí)驗(yàn)組與無(wú)藥對(duì)照組之間差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。
　　7.PHA刺激的PBS

8、C中，F(xiàn)K-506組、UC-MSC組、FK-506+UC-MSC組共培養(yǎng)72h，上清中IFN-γ分泌情況為:PBSC組＞FK-506+ PBSC組＞UC-MSC+PBSC組＞FK-506+UC-MSC組+PBSC組，且各實(shí)驗(yàn)組與對(duì)照組間差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。
　　結(jié)論：
　　FK-506對(duì)UC-MSC增殖及凋亡無(wú)抑制作用，但能促進(jìn)其細(xì)胞周期G0/G1進(jìn)入S期。UC-MSC與FK-506均能抑制PHA刺激下PBSC的IFN-γ的分