白血病患者骨髓間充質(zhì)干細胞生物學(xué)特性研究ABO血型不合allo-HSCT后PRCA分析.pdf

1、本研究分為二部分: 第一部分 白血病患者骨髓間充質(zhì)干細胞生物學(xué)特性研究 [目的]:了解白血病患者來源的骨髓間充質(zhì)干細胞(MSC)的生物學(xué)特性，從細胞形態(tài)、生長特性、表面標志、細胞周期、多向分化、造血因子及腫瘤基因的表達等方面加以探討，為MSC的臨床應(yīng)用提供實驗依據(jù)。 [方法]:1.以密度梯度離心法分離骨髓單個核細胞，體外用低糖型DMEM/F12培養(yǎng)基進行貼壁培養(yǎng)，通過細胞形態(tài)、免疫表型以及向成骨和脂肪細胞分化能力

2、加以鑒定。 2.利用流式細胞儀對培養(yǎng)的MSC進行表型測定、細胞周期分析。 3.以RT-PCR檢測IL-6、IL-3、SCF和SDF-1等細胞因子及白血病相關(guān)的腫瘤基因表達。 4.以放射免疫法檢測MSC培養(yǎng)上清中IL-6、TNF-a的含量。 5.取第3代MSC在含有造血因子的半固體培養(yǎng)基中培養(yǎng)。 [結(jié)論]: 1.從白血病患者骨髓培養(yǎng)得來的MSC可于體外培養(yǎng)、傳代大量擴增，保持低分化狀態(tài)，具有向

3、脂肪以及成骨細胞分化的能力。 2.白血病患者來源MSC的細胞形態(tài)、細胞周期、免疫表型等方面均與正常成人MSC相似，且不表達與造血系統(tǒng)腫瘤相關(guān)的癌基因。 3.白血病患者的骨髓MSC具有正常MSC的生物學(xué)特性，在臨床的細胞治療中有潛在應(yīng)用價值。 第二部分 ABO血型不合異基因造血干細胞移植后純紅細胞再生障礙分析 [目的]:分析異基因造血干細胞移植(allo-HSCT)后純紅細胞再生障礙(PRCA)的病因、臨床

4、特征、治療和轉(zhuǎn)歸。 [方法]:總結(jié)1991年8月至2005年3月我院治療的224例患者allo-HSCT的臨床資料，分析受者年齡、供受者性別、移植方式、植入的有核細胞數(shù)、HLA配型、預(yù)處理方案[含全身照射(TBI)/不含TBI]，移植物抗宿主病(GVHD)的預(yù)防[含環(huán)孢菌素A(CsA)或不含CsA]，受者抗供者凝集素類型，移植前供、受者乙型肝炎病毒(HBV)感染，ABO血型不合組受者血型(O型或非O型)等因素與PRCA發(fā)生的關(guān)系