人參皂苷AD-2異構(gòu)體拆分及優(yōu)效晶型研究.pdf

1、AD-2是人參屬植物皂苷經(jīng)水解得到的一個皂苷，具有很好的抗癌活性。AD-2 C20為手性分子，存在異構(gòu)體。異構(gòu)體的構(gòu)型不同，通常也會有不同的藥理、藥物動力學(xué)活性以及毒性等生物學(xué)性質(zhì)，為了進一步研究其藥效差異，以HPLC-ELSD為基礎(chǔ)分別對間隔連續(xù)進樣法以及離線制備法在不同比例的流動相和不同進樣量下對AD-2差向異構(gòu)體分離制備情況進行了考察，通過比較制備效率、轉(zhuǎn)移率等篩選出最佳的制備方法。結(jié)果顯示2種方法最佳分離制備色譜條件和制備結(jié)果分

2、別如下:間隔連續(xù)進樣法流動相為甲醇-水(83∶17，v/v)，體積流量20 ml/min，進樣質(zhì)量濃度20 mg/ml，進樣量1 ml，20(S)-AD-2的制備效率為18.01 mg/h，20(R)-AD-2的制備效率為35.36 mg/h;離線制備法流動相為甲醇-水(81∶19，v/v)，體積流量20 ml/min，進樣質(zhì)量濃度200 mg/ml，進樣量2.5ml;20(S)-AD-2的制備效率為50.55 mg/h，20(R)-A

3、D-2的制備效率為51.93 mg/h。實驗結(jié)果證明離線制備法分離制備效率優(yōu)于小質(zhì)量濃度間隔連續(xù)進樣法，離線制備法操作簡單，重現(xiàn)性好，制備量大，為AD-2差向異構(gòu)體混合物的大量分離制備奠定了良好的基礎(chǔ)。
　　AD-2為固體原料藥，體內(nèi)試驗過程多數(shù)選用固體給藥途徑，固體藥物作為一種具有藥理作用的物質(zhì)，就和其他物質(zhì)一樣存在內(nèi)部分子排列不一樣而產(chǎn)生的的多晶態(tài)問題，其中包括晶型和非晶形。藥物晶型不同會使臨床用藥時產(chǎn)生不同的藥理作用，影響藥

4、物的療效及產(chǎn)生毒副作用，此外藥物多晶型存在會影響其穩(wěn)定性和安全性，在生產(chǎn)、儲存過程中亦會發(fā)生轉(zhuǎn)變，為了保證藥物質(zhì)量，開發(fā)最具優(yōu)勢的藥物晶型或非晶形是目前藥物研發(fā)過程中重要的研究內(nèi)容。本課題首次對AD-2多晶型進行研究，通過近熱飽和溶液冷卻揮發(fā)析晶的方法，在乙醇溶劑中結(jié)晶得到晶型Ⅰ，通過反向溶劑加入經(jīng)真空冷凍干燥得到不定型態(tài)，并通過粉末衍射(PXRD)、紅外光譜(IR)、電鏡掃描(SEM)、示差熱分析法(DSC)分析晶型Ⅰ表征，并考察晶型

5、Ⅰ和不定型態(tài)小鼠體內(nèi)藥效差異。AD-2晶型Ⅰ和不定型態(tài)抗CCl4致小鼠肝纖維化活性試驗采用昆明(KM)小鼠50只，按體重隨機分配為空白對照組(Con)、模型對照組(CCl4)、陽性對照組(CCl4+水飛薊賓)、晶型Ⅰ組（CCl4+晶型Ⅰ）、不定型態(tài)組（CCl4+不定型態(tài)），用CCl4造模同時給予藥物干預(yù)治療，試驗7周，末次給藥后采取眼球采血，剖取肝臟，通過血清中AST、ALT含量及肝臟損傷和纖維化程度比較其治療效果。結(jié)果顯示晶型Ⅰ和不定