不同劑量順鉑誘導(dǎo)小鼠急性腎損傷模型觀察及生物學(xué)指標(biāo)檢測.pdf

1、背景:
　　急性腎損傷(acute kidney injury，AKI)是指一組以急性腎功能減退為特征的臨床綜合征，常見繼發(fā)原因?yàn)樗幬铩⑹中g(shù)等因素，主要以尿量減少、氮質(zhì)血癥、液體平衡紊亂和電解質(zhì)紊亂為臨床表現(xiàn)，分為腎前性、腎性和腎后性三種類型。近年來，隨著各種藥物應(yīng)用及環(huán)境變化，其發(fā)生率正在逐年增加，嚴(yán)重者可危及患者生命。據(jù)統(tǒng)計(jì)，在住院及非住院病人中，僅由腎毒性藥物引起的AKI大約占20％1]。順鉑（cis-diamminedic

2、hloroplatinumⅡ，CDDP）是一種廣泛應(yīng)用于實(shí)體瘤和血液腫瘤的抗癌藥物，在20％接受藥物治療的患者中發(fā)生腎毒性，引起腎小管上皮細(xì)胞損傷1]，因此成為其臨床應(yīng)用的一個(gè)重要限制因素。在實(shí)驗(yàn)中通常通過應(yīng)用CDDP誘導(dǎo)動物AKI模型，關(guān)于應(yīng)用CDDP誘導(dǎo)動物模型的劑量大小問題，已有的文獻(xiàn)報(bào)道不完全統(tǒng)一[2-4]。本實(shí)驗(yàn)通過不同劑量的CDDP建立AKI模型，觀察血肌酐(serum creatinine，Scr)濃度及血紅素氧化酶-1(

3、heme oxygenase-1，HO-1)、調(diào)節(jié)正常T細(xì)胞表達(dá)和分泌因子(regulated upon normal T cell expressed and secreted factors，RANTES)的表達(dá)在病理過程中的變化。
　　目的:
　　1.觀察不同劑量、不同時(shí)間點(diǎn)CDDP的腎毒性作用。
　　2.研究HO-1和RANTES在AKI疾病發(fā)展過程中的表達(dá)情況并探討其意義。
　　方法:
　　1.選

4、取60只6-8周左右健康雄性昆明小鼠，采用隨機(jī)數(shù)字法分為4組:模型組A、B、C，正常對照(normal control，NC)組。模型組通過單次腹腔注射CDDP，劑量分別為:10mg/kg、15mg/kg、25mg/kg[2-4]。依據(jù)參考文獻(xiàn)，注射CDDP前用等量0.9％無菌生理鹽水稀釋其濃度為1mg/ml[5]，建立AKI動物模型，NC組分別注射等劑量生理鹽水。
　　2.分別在模型建立后第1、3、5天，不同時(shí)間點(diǎn)每組各隨機(jī)抽取

5、5只小鼠，收集血液標(biāo)本檢測Scr濃度，并取腎組織采用蘇木精-伊紅染色（hematoxylin eosinstaining，HE），觀察各組腎組織病理改變，運(yùn)用酶聯(lián)免疫吸附測定法(enzyme-linkedimmunosorbent assay，ELISA)和免疫組織化學(xué)（immunohistochemical，IHC）染色方法測定各組小鼠腎臟組織HO-1和RANTES的濃度及表達(dá)情況。
　　結(jié)果:
　　1.與NC組比較，3d

6、、5d模型各組的Scr濃度明顯上升，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）。模型各組兩兩比較，Scr濃度水平之間的差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05)。
　　2.與NC組比較，模型各組HO-1和RANTES的蛋白濃度明顯升高，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05)。模型各組兩兩比較，HO-1和RANTES的濃度水平之間的差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05)。
　　3.與Scr相比較，HO-1和RANTES的濃度在腎損傷發(fā)生早期明顯升高。