大鼠多器官成纖維細(xì)胞nanog蛋白的表達(dá)差異.pdf

1、背景：
　　成纖維細(xì)胞來源于胚胎組織中胚層，在組織中廣泛分布，近年發(fā)現(xiàn)，外在損傷等微環(huán)境刺激可使其轉(zhuǎn)變有功能的效應(yīng)細(xì)胞;離體培養(yǎng)的成纖維細(xì)胞與骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞表面標(biāo)志物類似，多向分化潛能逐漸被人們所認(rèn)識，可作為細(xì)胞工程的種子細(xì)胞。然而正常器官的成纖維細(xì)胞是否均具有多潛能？不同器官成纖維細(xì)胞是否存在差異？離體培養(yǎng)的成纖維細(xì)胞的多潛能性與組織是否相同等，目前尚未見比較性研究。
　　目的：
　　探討新生大鼠和成年大鼠心、肝、

2、脾、肺、腎和皮膚中成纖維細(xì)胞表達(dá)nanog蛋白差異及其意義。
　　方法：
　　1.免疫組織化學(xué)法分別對新生大鼠、成年大鼠心、肝、脾、肺、腎和皮膚中的成纖維細(xì)胞進(jìn)行vimentin標(biāo)記，以對成纖維細(xì)胞進(jìn)行鑒定;并對各組織成纖維細(xì)胞行nanog蛋白標(biāo)記，比較不同器官中nanog陽性細(xì)胞的分布差異;
　　2.免疫熒光雙標(biāo)技術(shù)分別對新生大鼠、成年大鼠心、肝、脾、肺、腎和皮膚中的成纖維細(xì)胞進(jìn)行nanog和vimentin雙重標(biāo)記

3、，檢測并比較不同器官中成纖維細(xì)胞nanog蛋白表達(dá)比率。
　　3.酶聯(lián)合消化法體外分離培養(yǎng)新生大鼠6種器官中的成纖維細(xì)胞，在細(xì)胞水平進(jìn)一步驗證成纖維細(xì)胞表達(dá)nanog蛋白特征，并與組織相比較。
　　結(jié)果：
　　1.在新生大鼠每個器官中均有少數(shù)成纖維細(xì)胞表達(dá)nanog蛋白，其表達(dá)率分別為心(10.07±0.77)％、肝（9.97±3.70）％、脾(11.23±2.98)％、肺(15.07±2.87)％、腎（11.75±2

4、.76）％、皮膚（16.14±1.28）％，其中皮膚和肺的表達(dá)率高于心、肝、脾、腎(P＜0.05);而成年大鼠各器官很少表達(dá)nanog，只有肺、脾、腎存在少量表達(dá)，新生大鼠和成年大鼠比較，存在明顯差異，P＜0.05。
　　2.新生大鼠分離培養(yǎng)的成纖維細(xì)胞純度較高，表達(dá)nanog蛋白的細(xì)胞數(shù)明顯高于組織。
　　結(jié)論：
　　1.新生大鼠和成年大鼠心、肝、脾、肺、腎和皮膚的部分成纖維細(xì)胞表達(dá)nanog蛋白，提示成纖維細(xì)胞具有