乙酰肝素酶mRNA在乳腺癌中的表達及其與乳腺癌病理特征的關(guān)系.pdf

1、背景：乙酰肝素酶(HPA)是一種葡萄糖醛酸脂酶，其能夠在特定部位裂解硫酸乙酰肝素蛋白聚糖(heparin sulfate proteoglycan，HPSG)中的硫酸乙酰肝素(HS)鏈，進而導(dǎo)致細胞外基質(zhì)(extra cellular matrix，ECM)和基底膜(basement membrane，BM)發(fā)生降解，促進腫瘤的浸潤、轉(zhuǎn)移與微血管形成[1-2]。乳腺癌是我國比較多發(fā)的惡性腫瘤之一，目前國內(nèi)有關(guān)于HPA mRNA是否在乳腺

2、癌中表達的情況未見報道，也無文獻報道其是否與腫瘤的侵襲性生長、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移和血管形成有關(guān)。本研究采用原位雜交方法和腫瘤微血管免疫組織化學(xué)技術(shù)檢測50例乳腺癌組織中的HPA mRNA的表達和腫瘤微血管密度（microvessel density，MVD），對HPA mRNA在乳腺癌組織中的表達及其臨床意義進行探討。
　　目的：探討乙酰肝素酶(HPA) mRNA及CD34在乳腺癌組織中的表達，分析HPAmRNA與乳腺癌病理特征及MVD的

3、關(guān)系。
　　方法：收集新鄉(xiāng)醫(yī)學(xué)院第一附屬醫(yī)院2013年2～9月手術(shù)切除的50例乳腺癌組織標本及50例相應(yīng)癌旁正常乳腺組織（距離腫瘤邊緣5cm以上）標本，患者均為女性，年齡23～76歲，中位年齡56歲，患者術(shù)前均未接受放射治療、化學(xué)治療及內(nèi)分泌治療;術(shù)后常規(guī)病理切片均證實為乳腺癌。按國際抗癌協(xié)會分類標準:Ⅰ級14例，Ⅱ級26例，Ⅲ級10例;Ⅰ期10例，Ⅱ期24例，Ⅲ期16例;N018例，N120例，N29例，N33例。每例標本均分為

4、2份，一份用液氮保存，待提取組織RNA;另一份應(yīng)用40 g·L-1多聚甲醛固定，生物自動脫水機處理后石蠟包埋，行免疫組織化學(xué)染色。采用RT-PCR檢測HPA mRNA的表達情況及免疫組織化學(xué)方法檢測CD34的表達情況。應(yīng)用SPSS19.0軟件進行統(tǒng)計分析，計量資料以均數(shù)±標準差（(x)±s）表示，兩兩比較采用t檢驗，計數(shù)資料比較采用x2檢驗，檢驗水準為α=0.05。
　　結(jié)果：通過統(tǒng)計分析對比，乳腺癌組織和癌旁正常乳腺組織中HPA

5、 mRNA陽性表達率分別為70.0％(35/50)和24.0％(12/50)，乳腺癌組織中HPA mRNA陽性表達率顯著高于癌旁正常乳腺組織(P＜0.01); HPAmRNA的表達與乳腺癌組織學(xué)分級、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移、TNM分期及腫瘤侵襲程度有相關(guān)性(P＜0.05，P＜0.01)，與患者的年齡無關(guān)(P＞0.05);CD34陽性表達主要位于血管內(nèi)皮細胞的胞膜和胞質(zhì)，呈棕黃色;35例HPA mRNA陽性患者為MVD為58.20±18.56，15例