環(huán)氧化酶在炎癥因子引起冠狀動脈無復流現(xiàn)象中的作用機制研究.pdf

1、目的：
　　初步觀察炎癥因子（CRP、IL-6）與AMI急診PCI前后冠脈血流的關(guān)系，通過建立CRP濃度刺激的人冠狀動脈內(nèi)皮細胞(HCAEC)模型，探討環(huán)氧化酶(COX)1、2在炎癥因子引起冠狀動脈無復流現(xiàn)象中的作用及機制，尋找預測無復流的臨床指標，從而為進一步提高PCI術(shù)后遠期療效提供可行的治療方案和指導。
　　方法：
　　臨床研究:入選2012年1月至2014年1月44例因急性心肌梗死入住本院的患者，其中男性35名

2、，女性9名，年齡31～91歲，平均年齡60.93±14.46歲，梗死時間＜12小時。急性心肌梗死的診斷依據(jù)美國心臟病學會(ACC)和歐洲心臟病(ESC)學會標準。入選標準:(1)長時間的胸痛（時間＞30分鐘）;
　　(2)標準心電圖上在2個或2個以上相鄰導聯(lián)ST段抬高＞0.20 mV;(3)胸痛發(fā)作6小時內(nèi)執(zhí)行直接PCI或補救PCI。為避免其他變量影響C-反應(yīng)蛋白的水平，術(shù)前排除PCI前2個月內(nèi)有手術(shù)或外傷史者、腎功能不全（肌酐＞

3、1.50 mg/ dl）、惡性腫瘤、發(fā)熱性疾病，不明原因發(fā)熱者（體溫≥37.5℃），急性或慢性炎性疾病以及近期感染的患者。所有納入研究的患者均符合完全或部分冠狀動脈急性閉塞，參照GIBSON等冠狀動脈血流分級方法，相關(guān)動脈PCI前TIMI心肌灌注分級(TMPG)為0-1級，術(shù)前靜脈取血;術(shù)后根據(jù)患者冠狀動脈血流情況分為兩組，TMPG0-1級為無復流組(n=13); TMPG2-3級為復流組(n=31)。所有患者均自愿參加本研究，簽署知情

4、同意書。兩組患者一般資料比較，差異無統(tǒng)計學意義(P＞0.05)。采用ELISA試劑盒測定急診PCI術(shù)前血清炎癥因子（CRP、IL-6）水平，觀察其與術(shù)后無復流現(xiàn)象之間的關(guān)系。
　　基礎(chǔ)實驗:構(gòu)建人冠狀動脈內(nèi)皮細胞(HCAEC) CRP刺激的模型:(1) CRP刺激試驗:對照組、5分鐘組、30分鐘組和60分鐘組，即在饑餓處理后的HCAEC培養(yǎng)皿中加入CRP，于5分鐘、30分鐘和60分鐘分別終止CRP刺激，空白對照組加入等量溶劑;(2

5、)細胞外調(diào)節(jié)蛋白激酶(extracellular regulated proteinkinases，ERK1/2)、c-jun氨基末端激酶(c-jun N terminal kinase，JNK1/2)抑制試驗:對照組、ERK1/2抑制劑預處理組、JNK1/2抑制劑預處理組和同時加用pd98059和sp600125組(CRP+PD+SP組)。運用Real-Time PCR、Western Blot測定COX1，2基因轉(zhuǎn)錄、蛋白表達情況，

6、探討CRP在無復流發(fā)生發(fā)展中的作用機制。
　　統(tǒng)計分析:采用應(yīng)用SPSS20.0版軟件進行數(shù)據(jù)統(tǒng)計處理，計量資料采用x±s表示，成組設(shè)計資料的行t檢驗;計數(shù)資料以百分率表示，多組間的計量資料比較采用方差分析，在方差分析P＜0.05條件下，再行組間兩兩比較。P＜0.05為差異有統(tǒng)計學意義。圖表資料采用GraphPad Prism5.0繪制。
　　結(jié)果：
　　無復流患者CRP、IL-6水平明顯高于灌注良好者，差異具有統(tǒng)計學