2023年全國碩士研究生考試考研英語一試題真題(含答案詳解+作文范文)_第1頁
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文檔簡介

1、目的:(1)初步探討小鼠口腔癌模型骨髓單個播散細胞基因組的檢測方法。(2)初步探討小鼠口腔癌模型舌重度異常增生時期骨髓播散細胞RB1CC1基因純合性缺失及其意義。
  方法:(1)4NQO飲水法建立小鼠口腔癌淋巴道轉移模型。定期處死小鼠,收集雙側股骨,F(xiàn)icoll密度梯度離心法提取骨髓單個核細胞層的細胞,并制作細胞涂片。以細胞角蛋白(CK)多克隆抗體為一抗免疫組化染色細胞涂片。小鼠的舌部進行常規(guī)HE染色檢測。(2)收集35只小鼠口

2、腔癌模型舌重度異常增生時期骨髓單個核細胞涂片,激光捕獲顯微切割技術(LCM)捕獲細胞涂片上的單個CK陽性(CK+)細胞。(3)單細胞全基因組擴增技術(WGA)擴增單個細胞的DNA。(4)聚合酶鏈反應(PCR)檢測其視網膜母細胞瘤誘導卷曲蛋白(RB1CC1)基因的第二、第六和第七外顯子純合性缺失情況,并與舌部正常,重度異常增生以及鱗癌組織各4例對照。
  結果:(1)LCM切割46個CK+細胞,成功從35只小鼠骨髓涂片各捕獲1個CK

3、+細胞,總共35個細胞,成功率76%。(2)擴增CK+細胞35個,單細胞WGA擴增成功且PCR成功擴增出內參GAPDH的單細胞為3個,成功率8.6%。(3)RB1CC1基因第二外顯子純合性缺失情況分別為單個CK+細胞(2/3),舌癌變組織(2/4),舌部正常組織(0/4),重度異常增生組織(0/4);RB1CC1基因第六外顯子純合性缺失情況分別為單個CK+細胞(0/3),舌癌變組織(0/4),舌部正常組織(0/4),重度異常增生組織(0

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