芪白顆粒制備工藝、質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)以及主要藥效學(xué)研究.pdf

1、芪白顆粒是由黃芪、白術(shù)、黃芩、女貞子、墨旱蓮、雞血藤、薏苡仁、菟絲子、茯苓、天花粉、三七以及甘草等12味中藥飲片組成的復(fù)方制劑，臨床上主要用于白細(xì)胞減少癥的的防治與治療。本課題的理論基礎(chǔ)為中醫(yī)藥理論，設(shè)計(jì)方法為正交試驗(yàn)法，實(shí)驗(yàn)?zāi)康氖谴_定芪白顆粒最佳制備工藝，對(duì)該制劑的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行研究；并初步探討芪白顆粒升白作用。
　　主要內(nèi)容如下：
　　一、芪白顆粒制備工藝研究
　　將處方中12味藥分成兩大類(lèi)，其中天花粉、茯苓、三七為

2、一類(lèi)，粉碎后原粉入藥，其余黃芪、白術(shù)、黃芩等9味藥為一類(lèi)，有效成分經(jīng)提取入藥。
　　以正交試驗(yàn)法為設(shè)計(jì)方法，考察芪白顆粒處方中其余9味藥的提取工藝。該部分研究中的提取溶劑為蒸餾水，考察因素為溶劑用量、提取次數(shù)和提取時(shí)間，考察指標(biāo)為浸膏得率和黃芩苷含量。通過(guò)研究將最佳提取工藝擬定為：以上9味藥的提取，溶劑用量為8倍量的水，提取次數(shù)為2次，提取時(shí)間為第一次2小時(shí)（黃芩沸后加入），第二次1小時(shí)，濾過(guò)，合并濾液，備用。
　　以正交試

3、驗(yàn)法為設(shè)計(jì)方法，考察水提液的醇沉純化工藝。該部分研究中的考察因素為藥液含醇量和藥液相對(duì)濃度，考察指標(biāo)為浸膏得率和黃芩苷含量。通過(guò)研究將最佳醇沉工藝擬定為：采用減壓濃縮方式進(jìn)行濃縮，至濾液濃縮為相對(duì)密度為1.18~1.22(60℃)的清膏，加一定量的乙醇，至藥液中的乙醇含量為60％，攪勻，藥液靜置12 h后，取上清液，備用。
　　以對(duì)比試驗(yàn)為設(shè)計(jì)方法，考察顆粒的成型工藝。該部分研究中的考察因素為糖粉、糊精加入量，考察指標(biāo)為顆粒的抗?jié)?/p>

4、性和口感。通過(guò)研究將最佳成型工藝擬定為為：采用減壓濃縮法，回收上述清膏中的乙醇溶液，濃縮至稠膏，加入天花粉、茯苓、三七細(xì)粉，再按一定的比例（稠膏:糊精:蔗糖粉=1:1:1）添加輔料，混勻，以75%乙醇制粒，顆粒于60℃干燥。
　　二、芪白顆粒質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)研究
　　以“顆粒劑”制劑通則為指導(dǎo)，檢查芪白顆粒的粒度、水分、溶化性、裝量差異及微生物限度。
　　采用顯微鑒別法對(duì)天花粉和茯苓2味藥進(jìn)行定性鑒別；采用薄層色譜法對(duì)黃芪、三

5、七以及甘草3味藥進(jìn)行定性鑒別；采用高效液相色譜法對(duì)黃芩進(jìn)行定性鑒別試驗(yàn)。結(jié)果表明，以上鑒別方法簡(jiǎn)單、安全、有效，可以對(duì)芪白顆粒中的6味藥進(jìn)行定性鑒別。
　　采用高效液相色譜法（HPLC）檢測(cè)芪白顆粒中黃芩苷含量；色譜柱：Prevail C18（4.6mm?250mm，5μm）；流動(dòng)相：甲醇-0.2%磷酸水溶液（50：50），流速：1.0 mL·min-1；進(jìn)樣量：10μL；檢測(cè)波長(zhǎng)：280nm；柱溫：25℃。結(jié)果表明，該方法科學(xué)、

6、靈敏、快速、可靠，可以準(zhǔn)確檢測(cè)出制劑中黃芩苷的含量。
　　三、HPLC法同時(shí)測(cè)定芪白顆粒中5種活性成分的含量
　　采用多指標(biāo)質(zhì)量控制模式對(duì)芪白顆粒進(jìn)行質(zhì)量控制，借助高校液相色譜儀，建立一種同時(shí)測(cè)定芪白顆粒臣藥黃芩、女貞子以及貴重藥三七中的黃芩苷、特女貞苷、人參皂苷Rg1、人參皂苷Rb1和三七皂苷R15種指標(biāo)成分含量的方法；色譜柱：Prevail C18（4.6 mm?250mm，5μm）；流動(dòng)相甲醇（A）-0.2%磷酸水溶液

7、（B），梯度洗脫；流速：1.0 mL·min-1；進(jìn)樣量：10μL；檢測(cè)波長(zhǎng)：203 nm；柱溫：25℃。結(jié)果表明，該方法簡(jiǎn)單、準(zhǔn)確、快速，可以全面、準(zhǔn)確評(píng)價(jià)芪白顆粒的質(zhì)量、確保臨床療效。
　　四、芪白顆粒主要藥效學(xué)研究
　　通過(guò)建立昆明小鼠白細(xì)胞減少癥模型，灌胃給予模型小鼠不同劑量的芪白顆粒，研究芪白顆粒對(duì)小鼠白細(xì)胞減少癥的預(yù)防和治療作用。結(jié)果表明，芪白顆?？梢陨吣Ｐ托∈笸庵馨准?xì)胞數(shù)目，增加骨髓有核細(xì)胞數(shù)，同時(shí)也能增加小