低壓電脈沖刺激對黑色素瘤小鼠的抑瘤作用的研究.pdf

1、目的：探討低壓電脈沖(low voltage electric pulses,LVEPs)刺激對B16F10黑色素瘤荷瘤小鼠腫瘤生長的抑制作用。
　　方法：1)采用B16F10黑色素瘤細(xì)胞于BALB/c小鼠背部皮下成功構(gòu)建荷瘤動(dòng)物模型，并隨機(jī)均分為4組：對照組、電脈沖（10hz、20hz、30hz）刺激組。2)設(shè)定相對安全的刺激電壓30 V、脈寬1ms，用不同頻率（10hz、20hz、30hz）的電脈沖作用于處理組小鼠，以30mi

2、n/d連續(xù)電刺激20d。3）每日測量各組腫瘤結(jié)節(jié)最長徑a、最短徑b，計(jì)算體積值及其相應(yīng)抑制率，并制作出各組腫瘤結(jié)節(jié)體積增長的變化曲線。4）經(jīng)20d電刺激，將各電刺激組和對照組小鼠的黑色素瘤組織進(jìn)行 HE染色并于光鏡下觀察其形態(tài)學(xué)變化。5）采用實(shí)時(shí)熒光定量聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)(qRT-PCR)測定各組黑色素瘤組織中半胱天冬蛋白酶-3(caspase-3)和基質(zhì)金屬蛋白酶-9（Matrix Metalloproteinase-9,MMP-9）mR

3、NA的表達(dá)變化。6）采用免疫組織化學(xué)染色法半定量檢測各組黑色素瘤組織中caspase-3和MMP-9蛋白的表達(dá)變化。
　　結(jié)果：1）經(jīng)電壓30 V、脈寬1ms、不同頻率（10hz、20hz、30hz）的電脈沖刺激后，與對照組相比：在電刺激7 d時(shí)30hz組小鼠的腫瘤體積縮小（P＜0.05）；在電刺激14 d時(shí)20hz組、30hz組小鼠腫瘤體積縮?。≒＜0.05）；在電刺激20 d時(shí)各電刺激組腫瘤體積縮?。≒＜0.05），且（10h

4、z、20hz、30hz）刺激組的抑制率分別為18.75％、32.03%、63.12%。2）經(jīng)20d電刺激，光鏡下可見電刺激組腫瘤細(xì)胞密集度下降、核固縮、壞死較對照組多，變化隨著頻率增大而明顯。3）各電刺激組caspase-3 mRNA及蛋白質(zhì)表達(dá)增加；MMP-9 mRNA及蛋白質(zhì)表達(dá)降低，且caspase-3、MMP-9表達(dá)強(qiáng)度變化隨著頻率增大而增強(qiáng)。
　　結(jié)論：低壓電脈沖刺激可抑制黑色素瘤小鼠腫瘤體積的增長，同時(shí)促進(jìn)caspas