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文檔簡介
1、目前,國內(nèi)外對降解纖維素的真菌研究較多,主要是由于真菌可以產(chǎn)生全組分的纖維素酶,可完全分解纖維素為菌體自身所利用。但由于細(xì)菌可以分解纖維素產(chǎn)乙醇、乙酸等對纖維素再利用,因而對細(xì)菌的研究日漸增多。多數(shù)細(xì)菌產(chǎn)生的內(nèi)切葡聚糖酶對結(jié)晶纖維素沒有活性,而且這些酶主要是胞內(nèi)酶或吸附于細(xì)胞壁上,很少能分泌到細(xì)胞外,增加了提純的難度,在工業(yè)上很少采用。本試驗所用細(xì)菌產(chǎn)生的纖維素酶多數(shù)分泌到胞外,降低了提純難度,利于工業(yè)生產(chǎn)利用,大大增加了研究價值。
2、r> 本研究選用于2001-2002年第十八次中國南極科學(xué)考察采集的海冰和海水中分離獲得南極海洋菌作為實驗材料,采用剛果紅鑒別培養(yǎng)基和DNS法測定進(jìn)行初篩和復(fù)篩,最終篩選出高產(chǎn)纖維素酶的菌株545,通過16S rDNA鑒定,菌株545屬于交替假單胞菌。通過對菌株545產(chǎn)酶條件的研究,發(fā)現(xiàn)該菌在生長溫度為5℃,初始生長pH為8.0,以麥芽糖為碳源,蛋白胨為氮源,培養(yǎng)96h時產(chǎn)酶最高。經(jīng)過硫酸銨沉淀—透析濃縮—離子交換層析—凝膠過濾層析,
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