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1、目的以市售的納米羥基磷灰石/聚酰胺66(納艾康R)骨植入材料為基礎(chǔ),制備生物相容性、成骨誘導(dǎo)性良好的載藥碳納米管復(fù)合絲素蛋白修飾的納米羥基磷灰石/聚酰胺66骨組織工程支架,促進(jìn)骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞的成骨分化。
方法1.考察不同類型的多壁碳納米管(MWCNT):未經(jīng)修飾的多壁碳納米管(p-MWCNT)、羧基化多壁碳納米管(MWCNT-COOH)、羥基化多壁碳納米管(MWCNT-OH)與骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞(bone mesenchyma
2、l stem cells,BMSCs)的細(xì)胞相容性。從細(xì)胞表面標(biāo)記、細(xì)胞骨架、細(xì)胞粘著斑蛋白、細(xì)胞增殖、細(xì)胞體外遷移和體內(nèi)分布等方面進(jìn)行研究,篩選與BMSCs相容性較好的碳納米管類型;2.配制羧基化碳納米管溶液和絲素蛋白溶液,得到不同含量MWCNT-COOH和絲素蛋白(Silk Fibroin,SF)溶液混合液;采用冷凍干燥法結(jié)合化學(xué)交聯(lián)法,對(duì)納米羥基磷灰石/聚酰胺66(nHA/PA66)多孔支架進(jìn)行CNT/SF表面修飾,制備碳納米管復(fù)
3、合絲素蛋白修飾的納米羥基磷灰石/聚酰胺66(CNT/SF-nHA/PA66)多孔骨組織工程支架;3.對(duì)支架的表面性質(zhì)、力學(xué)性能、孔隙率、降解性能進(jìn)行考察,并研究了BMSCs在支架上的細(xì)胞粘附與細(xì)胞增殖行為;4.為改善支架對(duì)BMSCs的成骨誘導(dǎo)性,使用MWCNT-COOH攜載地塞米松(Dexamethasone,DEX),制備了載藥的CNT/SF-nHA/PA66多孔支架,以考察載藥支架誘導(dǎo)BMSCs成骨分化的性能,同時(shí)檢測(cè)藥物在不同釋放
4、介質(zhì)中的體外釋放行為。
結(jié)果1.篩選獲得與BMSCs相容性較好的碳納米管類型—MWCNT-COOH;2.使用冷凍干燥的方法成功地在羥基磷灰石/聚酰胺66表面修飾上了碳納米管-絲素蛋白;構(gòu)建得到的CNT/SF-nHA/PA66多孔支架具有較為理想的孔隙結(jié)構(gòu)和貫通性;3.當(dāng)CNT/SF混合液中CNT的含量為0.2 mg/ml時(shí),修飾的復(fù)合支架更利于BMSCs的生長(zhǎng)。生物樣本的SEM表明,BMSCs能在修飾后的支架表面粘附、鋪展和生
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