BD0801靶向VEGF-VEGFR路徑體外抑制人HCC細胞株Be17402增殖和抗血管生成作用的研究.pdf

1、目的:
　　研究人源化抗VEGF單克隆抗體BD0801單藥及其聯合氟尿嘧啶(5-Fluorouracil，5-FU)/奧沙利鉑(oxaliplatin，OXA)體外對人肝細胞癌(HCC)細胞株Bel7402增殖和人微血管內皮細胞(HMEC-1)形成血管的抑制作用。
　　方法:
　　應用不同濃度BD0801單藥或BD0801聯合5-FU/OXA體外作用于Bel7402和HMEC-1細胞，以貝伐單抗(Bevacizumab

2、，Bev)為陽性對照藥，采用四甲基偶氮唑藍比色法(MTT)測定細胞增殖抑制率;DAPI染色熒光顯微鏡觀察細胞凋亡形態(tài);流式細胞術分析細胞凋亡率和周期分布;酶聯免疫吸附法(ELISA)檢測細胞培養(yǎng)液中血管內皮生長因子(Vascular endothelial growth factor，VEGF)水平變化;蛋白印跡法(Western blot)檢測細胞VEGF、pVEGFR蛋白表達水平變化;體外細胞劃痕和Transwell共培養(yǎng)實驗觀察藥

3、物對HMEC-1細胞遷移能力的影響;通過體外管腔形成實驗，觀察藥物對HMEC-1體外管腔形成能力的影響。
　　結果:
　　1、BD0801通過抑制VEGF/VEGFR通路活性而抑制Bel7402和HMEC-1細胞增殖，且能有效誘導兩株細胞凋亡、阻滯細胞周期。BD0801能降低兩株細胞培養(yǎng)液中VEGF水平，并對HMEC-1細胞遷移及管腔形成能力有一定抑制作用。
　　2、與單藥作用比較，BD0801聯合5-FU/OXA可顯

4、著增強抑制Bel7402和HEMC-1細胞增殖及誘導細胞凋亡作用，使S期細胞比例上升，并增強抑制VEGF/VEGFR通路活性作用，同時可增強抑制HMEC-1遷移及管腔形成。
　　3、與Bev單藥或聯合5-FU/OXA相比，BD0801單藥或聯合5-FU/OXA能更有效地抑制Bel7402和HMEC-1細胞增殖、誘導細胞凋亡及抑制VEGF/VEGFR通路活性，并能更有效地抑制HMEC-1遷移和管腔形成能力。
　　結論:

5、　　BD0801體外通過靶向VEGF/VEGFR路徑抑制HCC細胞Bel7402和內皮細胞HMEC-1生長、誘導細胞凋亡、阻滯細胞周期，并能抑制HMEC-1細胞遷移和管腔形成。與單藥作用相比，BD0801聯合細胞毒藥物5-FU/OXA體外通過靶向VEGF/VEGFR路徑增強抑制HCC細胞Bel7402和內皮細胞HMEC-1生長、誘導細胞凋亡、阻滯細胞周期，并能增強抑制HMEC-1細胞遷移和管腔形成。與Bev相比，BD0801的上述生物學